高中生物 第4章 现代生物技术 第15课时 聚合酶链式反应技术同步备课名师课件 北师大版选修1.pptVIP

问题探究 答案 1.实验过程分析 (1)离心的目的是什么？在离心的过程中，微量离心管的盖子为什么一定要盖严？ 答案　离心的目的是使反应液集中在离心管底部，提高反应效率。微量离心管的盖子一定要盖严，防止实验中脱落或液体外溢。 (2)在离心前要用手轻轻弹击管的侧壁，目的是什么？ 答案　离心前用手轻轻弹击管的侧壁目的是使反应液混合均匀。 (3)PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压蒸汽灭菌，为什么这样操作？还有哪些操作与此目的相同？ 答案　为避免外源DNA等的污染。在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换。 2.结果检测 (1)实验中为什么要测定DNA的含量？ 答案　实际操作过程中会有许多因素影响DNA含量，所以需要对DNA含量进行测定。 答案 (2)如何判断DNA扩增成功？ 答案　①可以通过计算DNA含量来评价扩增的效果。 ②电泳检测的方法，可以通过在紫外线下直接观察DNA带的分布及粗细程度来评价扩增的效果。 (3)PCR扩增过程可能会出现哪些异常结果？ 答案　样品产物少，或产生新的DNA。 答案 归纳总结 PCR扩增DNA片段的操作要点 (1)避免外源DNA的干扰，所用仪器、缓冲液、蒸馏水等都需要在使用前高压灭菌。 (2)缓冲液、酶、DNA引物和DNA模板等如果长期保存，需要在－20 ℃冰箱内保存。其中，DNA引物和