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选修1 生物技术实践 专题34 微生物的培养与应用---热点题型讲练 遵化市堡子店中学生物组 王海泉 (2016年江苏卷)定量分析是科学研究的重要方法。下列能用血细胞计数板直接计数的是( ) A.海拉细胞悬液 B.浓缩培养的噬菌体 C.自来水中大肠杆菌 D.蛙卵 【解析】 本题考查血细胞计数板计数的相关内容,意在考查考生的理论联系实际的能力。海拉细胞是体外培养的癌细胞,其细胞悬液可用血细胞计数板直接计数;噬菌体属于病毒,不能用血细胞计数板直接计数;自来水中大肠杆菌通常用稀释涂布平板法进行计数;蛙卵的体积比较大,可通过肉眼直接观察计数。 【答案】 A 例 1 (2016年江苏卷)漆酶属于木质素降解酶类,在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。如图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程,相关叙述正确的是(多选)( ) 例 2 【解析】 本题考查微生物的分离纯化等相关知识,意在考查考生的理解能力和运用所学知识解决实际问题的能力。漆酶属于木质素降解酶类,生活污水中含木质素类的物质少,则能降解木质素的产漆酶微生物较少,故生活污水不是分离产漆酶菌株的首选样品,A选项错误;产漆酶菌株可降解木质素,筛选培养基中应加入木质素来筛选产漆酶的菌株,可依据漆酶菌株的菌落特征挑出产漆酶的菌落,B选项正确;在涂布平板上挑取的菌落可能含有其他杂菌,可再通过平板划线法进一步分离纯化,C选项正确;对于需要长期保存的菌株,不适宜在常温下保存,应低温冷冻保存,D选项错误。 【答案】 BC (2015年江苏卷)做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是( ) A.高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖 B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上 C.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 D.用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上 例 3 【解析】 本题考查微生物的实验室培养与分离的相关知识,意在考查考生的理解分析能力及实验操作能力,难度中等。高压灭菌加热结束时,当压力表的压力降到零时,打开放气阀,打开盖子,如果提前打开放气阀,锅内压力突然下降,灭菌容器内液体会冲出容器,造成污染,A选项错误;倒平板时,培养皿盖打开一缝隙,不能将其放到一边,以免杂菌污染,B选项错误;接种时,接种环经火焰灭菌冷却后挑取菌落,不能趁热挑取,以免杀死微生物,C选项错误;由于培养时平板要倒过来放置,则用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上,D选项正确。 【答案】 D (2016年全国卷Ⅰ)空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下: ①配制培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O); ②制作无菌平板; ③设置空白对照组和若干实验组,进行相关操作; ④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。 回答下列问题: (1)该培养基中微生物所需的氮来源于________。若要完成步骤②,该培养基中的成分X通常是________。 例 4 (2)步骤③中,实验组的操作是_____________________________________。 (3)若在某次调查中,某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板,而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了________现象。若将30(即36-6)个/平板作为本组菌落数的平均值,该做法________(填“正确”或“不正确”)。 【解析】 本题主要考查微生物培养的相关知识,意在考查考生对所学知识的理解能力和应用能力。(1)牛肉膏、蛋白胨都含有N,可为微生物的生长提供氮源。制作无菌平板所用培养基为固体培养基,所以X应为琼脂。(2)根据实验目的可知,本实验的自变量为教室的不同高度,因变量为微生物的分布情况,故实验组的操作应为将实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上,开盖暴露一段时间。(3)空白培养基上出现菌落,说明培养基被污染了,即调查中出现了污染现象。实验过程中若培养基被污染,必须将其抛弃,重新制作新的培养基进行实验。 【答案】 (1)牛肉膏、蛋白胨 琼脂 (2)将实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上,开盖暴露一段时间 (3)污染 不正确 (2016年全国卷Ⅲ)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题: (1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用________对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是___________________________________
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