TU-1901紫外可见分光光度计.ppt

TU-1901紫外可见分光光度计 ——检验与维护 一、紫外可见分光光度法 1、检测原理 紫外可见分光光度法是利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射的吸收来进行分析的一种仪器分析方法。这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级间的跃迁，可用于定性分析，广泛应用于无机和有机物质的定量分析。 2、朗伯—比耳定律 朗伯—比耳定律是光吸收的基本定律，是分光光度法定量分析的依据。 当入射光波长一定时，溶液的吸光度A是吸物质的浓度C及吸收介质厚度ι（吸收光程）的函数。其常用表达式为，式中ε为系数： A = ε· ι·C 二、紫外可见分光光度计 一、基本结构 光源、单色器、吸收池、检测器及信号指示系统五个结成部分。 分光光度计的主要部件和工作原理： TU-1901单波长双光束分光光度计 （一）光源 紫外可见分光光度计理想的光源应具有整个紫外可见光域的连续辐射，强度应高，且随波长变化能量变化不大。在可见光区，常用钨丝灯（卤钨灯）为光源，波长范围为320～2500nm。在紫外光区，常用氢灯、氘灯为光源，波长范围为200～375nm。 TU-1901紫外可见分光光度计光源：卤钨灯与氘灯。 以下图片是该仪器的光源室及光源灯： （二）单色器 单色器是将光源发射的复合光分解为单色光的光学装置。 单色器一般由五部分组成：入光狭缝，准光器，色散器，投影器，出光狭缝。 色散器是单色器的核心部分，常用的色散元件是棱镜和光栅。TU-1901采用全息光栅，进一步降低仪器的杂散光，使仪器分析更加准确。 单色器的狭缝设计一定的宽度，经过狭缝的单色光是一个具有一定光谱宽度的谱带，称为光谱带宽。从理论上讲，狭缝的宽度愈小，波长愈接近单色光，但带宽太小，将使单色光的强度减小，使光电流信号减弱，降低信噪比。 由于分子吸收光谱的吸收峰比较宽和平滑，一般情况下光谱带宽2～6nm对分析结果影响不大。TU-1901配置为固定狭缝，光谱带宽为2nm。 （三）吸收池 吸收池是盛放样品溶液的容器，它具有两个相互平行、透光且具有精确厚度的平面。 （四）检测器 检测器是利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号。 三、分光光度计的检验和维护 （一）分光光度计的检验 为保证测试结果的准确可靠，新制造、使用中和修理后的分光光度计都应定期进行检定。单光束紫外-可见分光光度计的检定周期为1年，在此期间内，仪器经修理或对测量结果有怀疑时，应及时进行检定。 紫外可见分光光度计主要检验的几项技术指标 1、稳定度 2、波长准确度 3、透射比准确度 4、基线平直度 5、噪声 6、吸收池配套性 现购买仪器因配置不定，检验技术指标参数有所不一，用户检验时用依据厂家提供的指标参数进行检验。 吸收池的配套方法 在同一光径的石英吸收池装蒸馏水在220nm、700nm处测定；玻璃池收池装30mg/L的重铬酸钾溶液在440nm处测定，装蒸馏水在700nm处测定。 实际工作中，可采用如下校准方法：在测定波长下，将吸收池磨砂面用铅笔编号，于干净的吸收池中装入测定用溶剂，以其中一个为参比，测定其它吸收池的吸光度，若测定的吸光度为零或两个吸收池的吸光度相等，即为配对吸收池。若不能配对，可选出吸光度最小的吸收池为参比，测定其它吸收池的吸光度，求出修正值。 （二）TU-1901分光光度计测量条件的选择 1、测量波长的选择 通常都是选择最强吸收带的最大吸收波长λmax作为测量波长，称为最大吸收原则，以获得最高的分析灵敏度。 2、适宜吸光度范围的选择 任何光度计都有一定的测量误差，这是由于测量过程中光源的不稳定、读数的不准确或实验条件的偶然变动造成的。 一般来说，当透射比为15%～65%（吸光度0.2～0.8)时,浓度测量的相对误差较小,当A=0.434时,浓度的相对误差最小。在实际工作中，可通过调节待测溶液的浓度或选用适当厚度的吸收池的方法，使测得的吸光度落在所要求的范围内。 3、仪器狭缝宽度的选择 狭缝的宽度会直接影响到测定的灵敏度和校准曲线的线性范围。 狭缝宽度过大时，入射光的单色光降低，校准曲线偏离比耳定律，灵敏度降低；狭缝宽度过窄时，光强变弱，势必要提高仪器的增益，随之而来的是仪器噪声增大，于测量不利。 选择狭缝宽度的方法是：测量吸光度随狭缝宽度的变化。狭缝的宽度在一个范围内，吸光度是不变的，当狭缝宽度大到某一程度时，吸光度开始减小。