(三)采样方法(棉拭子法、压印法两种) 棉拭子法:用5×5cm的标准灭菌规格版,放在被检物 体表面,用浸有含有相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭 子,在规格板内横竖往返均匀涂抹5次,并随之转动棉 拭子,可连续采样1~4个规格板面积。剪去手接触部 分,并将棉拭子放入装有10ml含相应中和剂的试管 内,立即送检。门把等小型物体则采用棉拭子直接在 物体表面按一定顺序涂抹采样,结果计算用cfu/件表 示。 32 1、步骤(在25cm2规格板内横竖往返均匀涂抹各5次,连 续采4个规格板面积) 33 34 2、检测方法: (1)细菌总数检测:将采样管在混匀器上振荡20s或用 力振打80次,用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭 菌平皿,每一样本接种2个平皿,内加入已溶化的45~ 48℃的营养琼脂15~18ml,边倾注边摇匀,待琼脂凝 固,置36℃±1℃左右温箱培养48h,计算菌落数。 (2)致病菌检测 检测原则:致病菌的检测依据污染情况进行相应 指标的检测 35 (3)计算方法: 细菌菌落总数(cfu/cm2)=平皿上菌落平均数×采 样液稀释倍数/采样面积(cm2) 36 (四)结果判断 标准值 环境类别 范围 菌落总数cfu/cm2 致病菌* Ⅰ类 层流洁净手术室、层流洁净病 ≤5 不得检出 房 普通手术室、产房、婴儿室、 Ⅱ类 早产儿室
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