第十九章 真菌.pptVIP

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真 菌 郭庆合 真 菌 (fungus) 也称eumycota,来源于拉丁文fungus,即蘑菇。真菌自成一界,为真核细胞型微生物,它具有典型的细胞核,不含叶绿素,营养方式为吸收,无吞噬作用,营腐生、寄生、共生和超寄生生活。细胞壁含几丁质和B-葡聚糖。有完善的细胞器,有呼吸作用,能进行有性生殖和(或)无性繁殖。它与原核型微生物有许多不同点。 表19-1原核细胞型微生物与真核细胞型微生物的比较 人致病的真菌分为四类: 病原性真菌、条件致病性真菌、产毒真菌及致癌真菌。 真菌发病率,近年明显上升趋势,特别是条件性致病真菌更为常见,这于临床滥用抗生素、经常应用激素及免疫抑制剂、抗癌药物导致机体免疫功能下降有关。 真菌的形态特性 : 真菌按形态分为单细胞和多细胞两大类。 单细胞真菌呈圆形或卵圆形,如酵母菌和类酵母菌,以出芽方式繁殖,对人致病的主要有新生隐球菌和白假丝酵母菌。 多细胞真菌有菌丝和孢子,菌丝伸长分支,交织成团,称丝状菌,又称霉菌,对人致病的有皮肤癣菌等。 有些真菌因环境条件改变,可有一重形态转变为另一种形态,此真菌称为二相性真菌。 真菌的菌落特性: 1、酵母型菌落,是单细胞真菌的菌落,形态与一般细菌菌落相似,但较大些,菌落表面光滑、湿润、柔软、边缘整齐,如新生隐球菌,有部分单细胞真菌,可在培养基中形成假菌丝伸入培养基中,此菌落称酵母型菌落,如白假丝酵母菌。 2、霉菌菌落 是多细胞真菌的菌落,菌落呈棉絮状、绒毛状、粉末状,并产生不同的色素,如皮肤癣菌。 真菌的检验方法: 类同细菌检验,真菌的检验方法包括: 1.直接镜检细菌形态 2.抗原检测 3.真菌的分离培养与鉴定 4.真菌核酸检测及真菌毒素检测等 显微镜检验: 直接镜检对真菌的诊断较细菌更为重要。 许多标本不需染色即可直接镜检. 如癣病标本多用KOH湿片检查法,即取病变或病损部位、皮屑、甲屑置于载玻片,加一滴10%KOH液然后加盖玻片微微加热,使标本组织溶解透明,在显微镜下可观察到真菌的孢子和菌丝。 显微镜检验: 有些真菌标本需要做染色观察,常用的染色方法有乳酸酚棉兰染色、瑞氏染色、革兰染色、美蓝染色、荧光染色还有墨汁负染色。如革兰染色后,真菌孢子呈革兰阳性。 检测病人脑脊液标本中的新生隐球菌,需要做墨汁负染色后检查,背景为黑色,新生隐球菌和荚膜不着色。直接镜检简便、快速。 分离培养: 培养基 培养一般采用葡萄糖蛋白胨琼脂,即沙氏琼脂、PH4.0-6.0一般细菌不宜生长。 许多病原性真菌如白假丝酵母菌在血琼脂上生长良好,二相性真菌常使用营养更丰富的脑心浸液琼脂。 培养方法:平皿培养法、大试管培养和玻片培养等。 分离培养: 培养温度:28摄氏度,但深部真菌为37摄氏度,对二相性真菌培养时,28摄氏度培养真菌呈菌丝相(霉菌型),37摄氏度培养为组织型(酵母型)。 观察菌落生长情况是鉴别真菌的主要方法之一。 真菌的生化反应:试验方法同 细菌试验。 病原性真菌 深部真菌感染 深部真菌感染是指能侵袭深部组织和内脏及全身的真菌,主要有假丝酵母菌、隐球菌、曲菌、毛霉、组织胞浆菌和卡氏肺孢菌等,其中以隐球菌感染较常见。 组织胞浆菌为二相性真菌,假丝酵母菌、曲霉菌、毛霉和卡氏肺胞菌等为条件致病菌,只有在一定条件,才引起机体致病。 一、假丝酵母菌 假丝酵母菌(Candida),俗称念珠菌,生物学分类为半知菌亚门,半知菌纲,隐球菌目、假丝酵母菌为最常见的致病菌。 临床意义 白假丝酵母菌通常存在与人的口腔、上呼吸道和阴道粘膜上,当机体发生菌群失调或抵抗力降低时,可引起各种念珠菌病。 可引起阴道炎、外阴炎、龟头炎、包皮炎。 白假丝酵母菌可引起体质虚弱婴儿的鹅口疮。 引起肠炎、肺炎、膀胱炎、肾盂肾炎、脑膜炎、脑膜脑炎、脑脓肿,长期用静脉内导管引起全身假丝酵母菌病,病死率极高。 微生物特性: 白假丝酵母菌呈圆形或卵圆形,直径3-6UM。革兰阳性,着色不均匀。出芽方式繁殖,在组织内可见芽生孢子,假菌丝,在玉米粉培养基中可产生假菌丝和厚膜孢子。 微生物检验 标本直接检查 (1)直接显微镜检查:取脓汁,痰和局部炎性分泌物直接涂片,革兰染色后镜检,显微镜下见到革兰阳性、圆形或卵圆形菌体或孢子及假菌丝,可确认假菌丝酵母菌感染。 (2)、抗原检测 (3)、核酸检测 分离培养: 将标本接种在沙氏培养基上,25摄氏度或37摄氏度培养1-4天后,培养基表面可出现奶油色类酵母型菌落。 鉴 定 镜检可见假菌丝及芽生孢子。 此外还可以用芽管形成试验、厚膜孢子形成试验、糖同化和发酵试验进行鉴定。 药物敏感试验: 对二性霉素B、5-FC等药物敏感,但对5-FC极易产生耐药性。体外药敏实验一般不做。 隐球菌 隐球菌(Cryptococcus)归入半知菌亚门、半知菌纲,

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