反向高压制备教材.pptVIP

分析送样要求 －分析部12.30 内容 一． 反向制备液相 二． HPLC、LC-MS和GC-MS 三． NMR 一． 反相高压制备 1、 什么样的化合物可送反相置备 一、离子型化合物。 二、正相系统不能分离的化合物。 三、自己进行分离纯化达不到纯度要求。 A、样品应在甲醇、乙腈、DMF、DMSO或THF中有 良好的溶解性。 B、该化合物LC/MS保留时间在1.4-6min之间。 C、LC/MS图上能看出与相邻杂质峰有一定分离度。 2、常用的反相体系 一、反相体系的选择与化合物的性质有关。 二、通常为水-有机相(甲醇、乙腈)。为获得良好的色谱分离效果，有时会加入后处理可除去的酸、碱、盐。 3、后处理 一、用水-有机相进行的制备 A、用旋转蒸发仪除去有机相。 B、冻干。 二、用水-有机相及一定的酸、碱、盐进行的制备 A、用旋转蒸发仪除去有机相。 B、加入相应的酸、碱，使化合物呈非离子 状态，再用有机溶剂进行萃取。 C、旋干有机溶剂。 有的酸、碱、盐可直接冻干除去。 4、送样要求 一、先送LC-MS，得到相应的图谱。 二、确定该化合物的分子量、有紫外吸收及一定的分离 度。 三、按默认的组别进行送样，需填写送样单。 四、送样单上必须注明该化合物的样品编号、结构式、重 量、在酸碱条件下的稳定性、溶解性较好的溶剂、有没有成 盐、送样人、联系电话等内容。 五、送制备的样品，目标化合物的含量应在20%以上。 六、送制备的样品量超过10g以上尽量自己处理。如果非得送制备，必须有组长、项目负责人（张永亮、郭子红）、分析室主管（王永红）三人的签字。 七、样品如果非常急，必须要插队的，按上面的第六条操作。 二．HPLC、LC—MS、GC-MS 送样要求 LC-MS/ HPLC (1). 常用溶剂：甲醇、乙腈、水、四氢呋喃(均需色谱级)。 (2). 送样要求：固体约为2mg，液体10ul放入离心管，加 入色谱级溶剂溶解，0.45um微孔滤膜过滤到2ml的送样 玻璃瓶里（送UPLC的样品必须用0.22um微孔滤膜过 滤）, 样品量需1ml 以上，样品浓度约为2~4mg/ml并在 送样单上注明。 (3).若需使用特殊溶剂（如DMSO、 DMF）需注明，且含量 10%; 不得含有正相试剂如乙酸乙酯、石油醚、二氯甲 烷等，强酸强碱如硫酸、三乙铵等以免对系统造成污染。 (4).样品若需要回收，请在送样单上注明。 (5).如果是最终出货样品，请在送样单上注明。 GC-MS （1）常规正相、反相溶剂（除水外）均可，但需注明，尤其沸点较高的溶剂必须注明。 （2）固体约为2mg，液体10ul放入离心管，加入色谱级溶剂溶解，过滤到2ml的送样玻璃瓶里。样品量1ml 以上，样品浓度约为2~4mg/ml并在送样单上注明。 （3）如果是检测纯溶剂的纯度，取纯溶剂 1.5ml以上直接放入送样玻璃瓶里，并注明是纯溶剂。 （4） 规范填写送样单，务必注明组别、分子式、准确分子量、化学结构式。样品沸点需小于300度，请务必注明沸点！ THANK YOU ! * 三．NMR仪器VARIAN MERCURY300 可以做的实验 氢谱，19F、31P-NMR，13C-NMR, DEPT45, DEPT90, DEPT135， COSY, HSQC, HMBC, NOESY 常规1H-NMR 响应时间：2h 送样要求 1. 核磁管上无裂痕，管壁干净清透。 2. 送样时，为避免氘代溶剂挥发,建议用PARAFILM密封核磁管帽口。 3. 样品最好能完全溶解，溶液澄清。 4. 氘代试剂体积约为0.6ml。 5. 氢谱样品量为5-10mg，碳谱样品量为30mg。? 6. 样品标志请用记号笔标明，不要用标签纸，帽上写各组项目名称的第一个字母（如Merck写Ｍ）．管壁上的标记请尽量写于管口处。 7.　最终化合物，请在送样单上注明。 8.　样品如要回收或有其它要求，请在送样单上注明，并于看到图谱两天之内取走，否则后果自负。 9．请按送样单的要求逐项正确完整地填写，氘代溶剂请注明。 图例 核磁管外表干净无污渍，管壁无明显裂纹 样品约5mg，溶于0.5ml氘代试剂，溶