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第四章 细胞融合 与 单克隆抗体 Cell Fusion and Monoclonal Antibodies 第一节 细胞融合 定义：指将不同来源的原生质体相融合，并使之分化再生、形成新物种或新品种的过程，又称为体细胞杂交 第一节 细胞融合 原理： 植物细胞-去细胞壁(酶消化) 动物细胞-分散(酶消化) -单个原生质体-诱导融合-筛选 关键：建立细胞桥 一、细胞融合剂 二、细胞融合方式 完整细胞之间的融合 核体、胞质体与完整细胞的融合作用 微小细胞与完整细胞的融合 脂质体介导的细胞融合 三、细胞融合技术 生物法（病毒诱导融合） 化学法（化学剂诱导融合） 物理法（电融合） 化学法：聚乙二醇（PEG）介导的细胞融合 原理： ①促使细胞凝结 （负电荷作用） ②破坏接触处细胞膜 （被洗脱） 影响因素： 分子量：4000—6000 浓度： 20—60% （通常：30—50%） pH： 偏碱为宜（pH7.4—8.0） 其他： 二甲亚砜、植物血凝素 物理法：细胞电融合 原理： 细胞在电场中极化成偶极子，并排列成串，然后用高强度、短时程的电脉冲击穿细胞膜。 甜菜原生质体电融合过程 注意事项 1）介质要求高 2）控制电压的强度和时间 优点： 融合率高 融合率＝（融合组多核细胞的核数－对照组多核细胞的核数/对照组的全部细胞数）×100％ 可在显微