结核分枝杆菌DNA修复fpg基因克隆表达及性质研究.pdfVIP

两南人学硕十学位论文 综述 1 ． 0=P--．O I 声 kta哪idoi铀咖icarid OreJ 图1几种DNA损伤的分子形式 图2AP水解位点分子结构式 someDNA structureofAP site Fig．1 damagcstyle Fig．2 hydrolysis DNA糖基化酶可以大致的被分为两大类：一类是单功能酶类、一类是双功能 酶类，两大类的酶是依据相应的作用机制不同来区分的，单功能酶它其作用方式 就是对受损碱基进行一步催化的取代反应，作用方式是用激活的水分子攻击C1’ 位点，双功能酶也要切除损伤碱基但是并不是用激活的水分子来进行攻击，取而 代之的是用蛋白氨的亲核基团来攻击C1’；共价连接的酶．底物复合物经过了多步 的级联反应在3’端切断DNA骨架，有时甚至在5’端产生DNA骨架的断裂(图3)。 在细菌中，FPG蛋白和人的hOGGl基因具有同源性，但催化效率比人的高 80倍。细胞培养实验已经将FPG蛋白在哺乳动物中表达，它能同时增强DNA的 修复和减少诱变剂所致的DNA突变。通过在组织中表达FPG蛋白，能够有效的 预防氧化性的DNA损伤。目前已经针对该类型的基因治疗的研究在开展之中【121。 霉吣 钿 Q、 e赫沁。…¨¨…¨… 、 ：y乏，／迕A≤，，oj跹1 嗍冬P，／ o专p／o 鹏·0 V、o． 弧o，’、节 ～ J一…duction l Bi。functi。n_al D啉、． o～i—o o Ho～一尸／鼍o Ho ～ ‰ k。瞰K蝴浍山se 图3DNA糖基化酶的作用机制分子构像变化 mechanismofmolecularconformation Fig．3 (1)识别复合体(2)Schift base中问体(3)3‘端剪切产物(4)单功能作用产物 (5)氢硼化物捕获复合体(6)3’和5’剪切产物 2 1．3FPG超家族、三维结构 FPG研究报道有四个超家族成员，分别是(1)单功能酶类：UDG家族(尿嘧 啶DNA糖基化酶)、AAG家族(烷基腺瞟呤DNA糖基化酶)。这两个酶的家族有相 糖基化酶)、HhH．GPD家族(依据激活催化结构域命名：具有螺旋一转角．螺旋结构、 富肯甘氢酸、脯氨酸的环状结构及具催化活性的天冬