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第四章 微生物的营养与培养基 营养物质(nutrient)：凡是能满足微生物生长、繁殖和完成各种生理活动所需要的物质。 营养：微生物获得和利用营养物质的过程。 第四章 微生物的营养与培养基 第一节 微生物的营养要素——微生物需要吃什么？ 第二节 微生物的营养类型 第三节 培养基——怎样给微生物做饭？ 第四节 营养物质进入微生物细胞的方式——微生物怎样获得营养物质？ 第一节 微生物的6大营养要素 一、碳源 二、氮源 三、能源 四、无机盐 五、生长因子 六、水 （一）碳源 凡是能为微生物的生长和代谢提供碳素来源的物质统称为碳源。 功能：①构成微生物的细胞物质；②碳源物质是大多数微生物的能量来源；③为含碳代谢产物的合成提供底物和中间代谢产物。 自然界各种含碳物质都能被不同的微生物所利用 异养型微生物：必须利用有机碳作为碳源的微生物。 自养型微生物：可以利用无机碳源物质作为主要或唯一碳源的微生物。 同一微生物对不同碳源的利用速度也不同 对于大多数异养型微生物来说： C.H.O的糖类为最好的碳源 其中：利用速度 单糖优于双糖和多糖，六碳糖优于戊糖； 淀粉优于其他多糖 常用碳源： 实验室：单糖（葡萄糖）、双糖（蔗糖）、淀粉 发酵生产：单糖（葡萄糖）、双糖（蔗糖、麦芽糖 ）、淀粉、糖蜜、糊精、油和脂肪、石油和石油产品、酸等 （二）氮源 凡是能为微生物的生长和代谢提供氮素来源的物质统称为氮源。 一般情况下，氮源物质不能用作能源 氮源的种类 无机氮：铵盐、硝酸盐和氨水 、尿素等 有机氮 ：玉米浆、黄豆饼粉、花生饼粉、蛋白胨、酵母粉、鱼粉 、牛肉膏等 分子氮：N2 （三）能源 化学能 辐射能 无机盐的生理功能： （五）生长因子 概念：一般指一类调节微生物正常生长代谢所必需，但不能用简单的碳、氮源合成的有机物。 主要包括维生素（作为辅酶或辅基）、碱基、卟啉、甾醇、胺类、低链（C2-C6）脂肪酸（细胞膜的合成有关）等 生长因子自养型：大多数微生物都能自己合成这些物质，不需要另外添加。 生长因子异养型微生物： 生长因子的添加： 天然的营养基质如酵母膏、牛肉浸膏、麦芽汁、玉米浆及动植物组织提取液和微生物培养液 生长因子复合液 生长因子过量合成型：有些微生物能过量合成某种生长因子 （六）水 功能： ①水是良好的溶剂和运输介质，营养物质必须溶解在水中才能被吸收和代谢，代谢产物的分泌也需借助于水来完成； ②直接参与细胞内的一系列化学反应和细胞成分的组装和解离； ③水的比热高，是热的良好导体，有利于调节细胞温度和保持环境温度的稳定； ④水还有利于生物大分子结构的稳定 第二节、 微生物的营养类型 根据微生物所利用的碳源、氢供体、能源可将微生物分为以下四种营养类型。 第三节 培养基 培养基（medium)：由人工配制的适合微生物生长、繁殖或适合积累代谢产物的营养基质。 一、设计和配制培养基的基本原则 目的明确——选择适宜的营养基质 营养协调——调配好各种营养物质的浓度比 理化适宜 控制pH值 控制氧化还原电位 经济节约 （一）选择适宜的营养基质 培养基必须含有微生物生长的六大营养要素（碳源物质、氮源物质、无机盐、生长因子、水和能源物质） 根据培养的微生物的对象和目的不同选择不同的营养基质 根据培养的微生物对象选择相应的培养基 培养细菌的一般培养基：营养肉汤培养基（牛肉膏蛋白胨培养基） 培养放线菌的一般培养基：高氏一号培养基 培养酵母菌的一般培养基：马铃薯蔗糖培养基 培养霉菌的一般培养基：查氏培养基(zapek medium) 根据培养的目的：一般培养？精细的生理生化研究？发酵生产？获得菌体还是得到代谢产物？代谢产物的类型？等等。 （一）选择适宜的营养基质 培养自养型微生物-不加入有机物质，如培养氧化硫硫杆菌培养基 培养一些特殊要求的微生物：选择特殊的营养基质 如分离能产生纤维素酶的微生物，分离固氮微生物 （二）调配好各种营养物质的浓度比 要素： H2O C N P、S K、Mg 生长因子 含量g/L： 1L ~10 ~1 ~ 1 ~ 0.5 ~0.005 一、设计和配制培养基的基本原则 1、控制pH值 　　 为什么要调节pH? 不同微生物最适pH不同： 细菌：pH7.0~8.0 霉菌：pH4.0~5.8 放线菌：pH7.5~8.5 酵母菌：pH3.8~6.0 微生物在生长过程中会改变培养基中的pH： pH调节方式： 初始pH的调节： 内源调节： 采用磷酸盐缓冲液等 采用CaCO3作为备用碱 外源调节（发酵生产）：流加 一、设计和配制培养基的基本原则