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主 要 内 容 ◆ 研究背景 ◆ 研究目的 ◆ 研究方案 ◆ 结 果 ◆ 分析与讨论 ◆ 结 论 EB病毒(Epstein-Barr virua,EBV)属于γ疱疹病毒科。引起的主要疾病包括传染性单核细胞增多症、移植后淋巴细胞增多症(PTLD)、霍奇金病、Burkitt淋巴瘤以及鼻咽癌(NPC)。 研 究 背 景 表位疫苗是目前研制感染性疾病与恶性肿瘤疫苗的方向。 多表位疫苗能选择性诱导多价、多特异性应答和控制免疫应答类型。 动物：ICR小鼠 免疫方式：背部皮下多点注射 采血方式：眶静脉采血，3只/组 以纯化的融合蛋白作包被抗原 以B95.8细胞作包被抗原 选择抗原性强的融合蛋白作包被抗原，检测NPC组、CA疾病对照组和健康对照组的血清特异性抗体 结 果 分 析 与 讨 论 分 析 与 讨 论 3种表位融合蛋白均具有良好的免疫原性 B细胞表位多肽均能诱导产生特异性抗体 以B95.8细胞作为抗原包被酶标板， B细胞表位 融合蛋白诱导的小鼠免疫血清与EBV抗原特异 　性结合，但抗体效价较低，可能是由于单个表位 肽的结合能力较弱。 结 果 三、EBV LMP2 B细胞表位融合 蛋白免疫原性的初步研究 结 果 图13 不同免疫原在不同时间的抗体均值（X±SD） 分别包被3种表位融合蛋白ozlf-67、ozlf-69和ozlf-71，分别 检测3种表位融合蛋白的免疫血清与His蛋白免疫血清的抗体效 价差异。 结 果 图14 多肽表位诱导鼠免疫血清的抗体效价的ELISA检测结果 * * ：与His蛋白免疫组比较 * * 结 果 B95.8细胞作为包被抗原，ELISA检测3种表位融合 蛋白免疫小鼠制备的鼠血清抗体效价。 图15 B95.8细胞包被ELISA检测鼠免疫血清抗体效价 * ：与His蛋白免疫组比较 * * * 结 果 选用Ozlf-67融合蛋白为诊断抗原，ELISA检测NPC组、 CA疾病对照组及健康对照组血清特异性IgG抗体。 图16 ozlf-67蛋白包被ELISA检测病人血清抗体效价 * ：与正常组比较 * 结 果 分组 份数 A值 阳性 阴性 阳性率 NPC组 48 0.866 ±0.231 34 13 70.8％ CA组 68 0.140 ±0.106 4 64 5.9％ 正常组 68 0.184 ±0.067 0 68 0 表5 ozlf-67蛋白包被ELISA检测病人血清抗体阳性率 * *与正常组比较 * 分 析 与 讨 论 预测的B 细胞表位是线性B 细胞表位，主要 的参数有二级结构、跨膜区、亲水性、表面可及 性、抗原性以及柔韧性等，抗原性和亲水性是形 成表位的首要条件，因而优势表位的形成是多种 因素综合作用的结果。 采用分子生物学方法分别得到了包含预测 表位片段的重组质粒，并得到了融合蛋白，为 进一步表位融合蛋白的免疫学检测奠定基础。 * * EBV LMP2 B细胞表位的预测、克隆、表达及其融合蛋白免疫原性的初步研究 温州医学院2004级硕士学位论文答辩 答辩人：欧 琴 导 师：张丽芳 教授 夏克栋 教授 专 业：病原生物学 2007.5.17 研 究 背 景 研 究 背 景 肿瘤 亚型 EBV阳性率 表1 EBV相关的增生性疾病 Burkitt淋巴瘤 E-BL 100% S-BL 15%-85% AIDS-BL 100% NPC