阴离子表面活性剂检测作业指导书.doc

阴离子表面活性剂检测作业指导书 1.试剂和材料 1.1氢氧化钠：4g氢氧化钠溶解于1000ml蒸馏水中。 1.2硫酸：2.78ml硫酸溶解于100ml蒸馏水中。 1.3二氯甲烷。 1.4十二烷基苯磺酸钠贮备溶液：称取0.100g标准物，准确至0.001g，溶于50ml水中，转移到100ml容量瓶中，稀释至标线并混匀。每毫升含1.00mg。保存于4℃冰箱中，有效期为一星期。 1.5 十二烷基苯磺酸钠标准溶液：准确吸取10.00ml十二烷基苯磺酸钠贮备溶液，用水稀释至1000ml，每毫升含10.0ug。当天配置。 1.6亚甲蓝溶液：称取30mg亚甲蓝，用50ml水溶解后也移入容量瓶在，用水稀释至标准线，摇匀。此溶液贮存于棕色试剂瓶中。 1.7洗涤液。 1.8酚酞指示剂。 1.9玻璃棉或脱脂棉：将玻璃棉或脱脂棉放在索式脂肪抽出器中用三氯甲烷提取4h后，取出干燥，保存在清洁的玻璃瓶中待用。 2.校准曲线 取一组分液漏斗10个，分别加入100ml、99ml、97ml、95ml、93ml、91ml、89ml、87ml、85ml和80ml水，然后分别移入0ml、1.00ml、3.00ml、5.00ml、7.00ml、9.00ml、11.0ml、13.0ml、15.0ml和20.0ml十二烷基苯磺酸钠溶液，摇匀。处理每一标准，以测得的吸光度扣除试剂空白值后与相应的DBS量绘制校准曲线。 3.测定 3.1将所取试份移至分液漏斗中，以酚酞为指示剂，逐滴加入1mol/l氢氧化钠溶液至水溶液呈桃红色，再滴加0.5mol/l硫酸到桃红色刚好消失。 3.2加入25ml亚甲蓝溶液，摇匀后再移入10ml三氯甲烷，激烈振摇30s，注意放气。过分的摇匀会发生乳化，加入少量异丙醇可消除乳化现象。加相同体积的异丙醇至所有标准中，再慢慢旋转分液漏斗，使滞留在内壁上的三氯甲烷液珠降落。静置分层。 3.3将三氯甲烷层放入预先盛有50ml洗涤液的第二个分液漏斗，用数滴三氯甲烷淋洗第一个分液漏斗的放液管，重复萃取三次，每次用10ml三氯甲烷。合并所有三氯甲烷至第二个分液漏斗中，激烈摇匀30s，静置分层。将三氯甲烷层通过玻璃棉或脱脂棉，放入50ml容量瓶中，再用三氯甲烷萃取洗涤液两次，此三氯甲烷层也放入容量瓶中，加三氯甲烷到标线。 3.4每一批样品测定时都要做一次空白试验校准曲线。 3.5在652nm处，以三氯甲烷为参比液，测定样品、校准溶液和空白试验的吸光度。以试份的吸光度减去空白试验的吸光度后，从校准曲线上查得DBS质量。 4.分析结果的表述 用亚甲蓝活性 报告结果： c=m/v 式中： c——亚甲蓝活性物质的量； m——从校准曲线上读取的DBS质量； v——试份的体积。