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空气消毒效果鉴定试验
2.1.3.1? 目的
??? 检测消毒器械或消毒剂对空气中细菌的杀灭和(或)清除作用,以验证其对空气的消毒效果。其他方法对空气的消毒效果,亦可参照本试验的有关原则进行。
2.1.3.2? 试验设备和器材
(1) 试验菌为白色葡萄球菌 8032,其菌悬液的制备方法见 2.1.1.2。
(2) 采样液[用于液体撞击式采样器采样。非化学因子杀菌试验时,用含抗泡沫剂(辛醇或橄榄油)的营养肉汤培养基;消毒剂杀菌试验时,用含相应中和剂的营养肉汤培养基(同样加入辛醇或橄榄油)]。
(3) 中和剂( 按 2.1.1.5 方法鉴定合格者)。
(4) 磷酸盐缓冲液( PBS,0.03 mol/L,pH 7.2 )。
(5) 普通营养肉汤培养基。
(6) 普通营养琼脂培养基。消毒剂杀菌试验时,尚需在其中加入相应的中和剂。
(7) 相邻的一对气雾柜或气雾室,一个用于消毒试验,一个用于试验对照。一对气雾柜或气雾室所处环境(包括温度、湿度、光照、密闭性、和通风条件等)应一致。柜(或室)宜以铝合金和玻璃构建。应安装温度和湿度调节装置以及通风机过滤除菌或其它消毒装置和相应管道,此外,还应开设供喷雾染菌、给消毒剂、采样等的袖套操作和样本传递等窗口。
(8) 喷雾染菌装置,包括空气压缩机、压力表、气体流量计和气溶胶喷雾器等。喷出细菌气溶胶微粒的直径 90% 以上应在 1μm~10μm 之间。
(9) 空气微生物采样装置,包括六级筛孔空气撞击式采样器、液体撞击式采样器、抽气设备、气体流量计等。
(10) 环境监测器材,如温度计、湿度计等。
2.1.3.3? 试验阶段
空气消毒试验分为实验室试验、模拟现场试验与现场试验。三个阶段试验的特点见表 2-5。
2.1.3.4? 实验室试验与模拟现场试验操作程序
(1) 取试验菌菌悬液,用无菌脱脂棉过滤后,再用营养肉汤培养基稀释成所需浓度。
(2) 同时调节两个气雾柜(或室)的温度、相对湿度至试验要求的温度和相对湿度。
(3) 将使用的器材一次放入气雾柜(或室)内,将门关闭。此后,一切操作和仪器设备的操纵均在柜(或室)外通过带有密封袖套的窗口或摇控器进行。直至试验结束,始可将门打开。
(4) 按设定的压力、气体流量及喷雾时间喷雾染菌。边喷雾染菌,边用风扇搅拌。喷雾染菌完毕,继续搅拌 5 min,而后静置 5 min。
(5)同时对对照组和试验组气雾柜(或室)分别进行消毒前采样,作为对照组试验开始前和试验组消毒处理前的阳性对照(即污染菌量)。气雾柜(或室)内空气中各阳性对照菌数应达5′104 cfu/m3~5′106 cfu/m3 。
表 2-5? 各阶段空气消毒试验的特点
项??? 目???????? 实验室试验???????????? 模拟现场试验??????????????? 现场试验???????????
?
?
目??? 的?????? 测定最低有效剂量?????? 测定最低有效剂量????????? 验证实用消毒效果
??? 试验柜(室) ?????≥1m3柜?????????????? 10m3~20m3室???????????????? ≥20m3房间
??? 采样器???????? 液体撞击式???????????? 六级筛孔空气撞击式????? ??六级筛孔空气撞击式
??? 菌??? 株?????? 白色葡萄球菌?????????? 白色葡萄球菌?????????? ???空气中自然菌
??? 试验菌雾粒???????? 10μm??????????????? 10μm?????????????????? 不??? 定
??? 温??? 度???????? 20℃~25℃??????????? 20℃~25℃???????????????? 自然条件
??? 相对湿度???????? 50%~70%????????????? 50%~70%??????????????? 自然条件
??? 中和剂???????? 加于采样液中????????? 加于采样培养基中????? ?????加于采样培养基中
??? 对??? 照???? 需有自然消亡对照??????? 需有自然消亡对照?????? ????不需自然消亡对照
结果计算??? ??????杀灭率???????????????? 杀灭率??????????????????? 消亡率????????????
在模拟现场试验时,用六级筛孔空气撞击式采样器采样,采样时,将六级筛孔空气撞击式采样器放在柜室中央1m 高处(采样方法按采样器使用说明书进行)。在实验室试验时,用液体撞击式采样器采样,采样器置柜内中央处。
??? (6) 按产品说明书规定的方法,在试验组气雾柜(或室)内进行消毒。对照组气雾柜室同时作相应(不含消毒剂)处理。
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