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实验二、肝糖原的提 取与鉴定 一、实验目的 学习和掌握提取肝糖原的方法; 学习和掌握肝糖的一些特殊化学性质和鉴定方法。 二、实验原理 肝糖是体内的重要储存形式之一,是体内糖的重要来源之一,糖原 是一高分子化合物。微溶于水,无还原性、与碘作用生成红色。 本实验通过对动物肝脏研磨,在三氯醋酸作用下一使其中的蛋白质被沉淀,二使糖原水解酶失活,从而过滤得到糖原。 三、实验步骤 一、提取: 称肝脏约1g+10%三氯醋酸1ml 研磨 +5%三氯 醋酸2ml 研磨至肉糜状 过滤(滤液收集在带刻度的 离心管中) 加入等体积95%乙醇 混匀、静置10min 离心 弃去上清夜、留沉淀 加蒸馏水1ml 搅拌溶解而得 糖原溶液待用。 二、鉴定: 加入肝糖原溶液10滴 1.取试管2支 各加1滴I2液、混匀 观察现象 加蒸馏水10滴 2.剩余肝糖原液内+浓HCL3滴 沸水浴10min 冷却 加入10%NaOH3-4滴至中 性偏碱性 斑氏试剂2ml 沸水浴5min 冷却 观察现象。 三.实验结果四.分析讨论 实验室普通离心机使用方法 1.将离心机放在坚实而平整的工作台上; 2.在适用的离心管中加入样品,必须对称配重,否则会损坏离心机; 3.按离心机转头的离心管位置刻度所对应孔插入,放下离心机顶盖; 4.检查确认调速钮处于最低速位置; 5.打开电源开关,调速到需要的转速; 6.选择工作时间,调“选时”钮到需要的位置。 7.离心完成,离心机自然停止。 2、离心机使用注意事项 (1)严禁各种液体和杂物进入离心工作室,那样会损坏主机; (2)仪器电源线应有良好的接地,以免发生意外; (3)离心机工作时不要打开顶盖; (4)电压的高低以及不稳定现象直接影响本机的转速(但不会损坏电机)。对转速要求较高的使用场合,请使用稳压装置,使运转速度稳定。 * * ? 糖原的结构及其连接方式 ?-1,6糖苷键 ?-1,4-糖苷键
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