基因工程在人类健康中的应用.pptVIP

模式小鼠制备 基本程序 1、目的基因克隆和体外重组 1）人工合成 2）互补DNA（cDNA）的克隆 3）DNA克隆 2、外源基因的导入 将目的基因转入→培养→产下后代 3、外源DNA整合、转录及表达的分子检测 是否是转基因动物 从细胞中分离出DNA 从大肠杆菌中提取质粒 限制 酶 提取目的基因 限制酶 目的基因与运载体结合 DNA连 接酶 目的基因导入受体细胞 目的基因的表达与检测 基因工程操作的基本步骤 通过病毒载体导入ES细胞建立转基因小鼠的技术路线 基因敲除基本原理 应用 在人类基因组研究中十分注重模式生物的研究，这是由于要认识人体基因的功能，无法直接用人体作为实验对象。但是，生物是从共同祖先演化而来的，所以对生命活动有重要功能的基因在进化上是保守的，也就是说，这些基因的结构和功能，在低等生物和高等生物中是相似的。因此，可以用比较容易研究的生物作为模型来研究其基因的结构和生物学功能，由此获得的信息可以使用于其他比较难以研究的生物，特别是推测相似的人体基因的功能。 应用：果蝇、大肠杆菌、斑马鱼、小鼠、酵母 疾病机制研究方面的应用： 几乎所有人类疾 病都与基因有关，利用基因工程动物的方法研究基 因的表达调控与疾病发生的关系，建立各种人类疾 病的动物模型，为人类疾病发病机制的研究提供了 十分有用的材料。 基因功能研究方面的应用 ：人类基因组 计划已完成，越来越多的 新基因被克隆，但对这些新基因在体内的具体功能 却很少了解。转基因技术具有能在个体水平从时间 和空问角度同时观察基因表达功能和表型效应的独 特优点，可通过建立高效表达转基因动物，观察基因 功能；还可通过构建含有不同报道基因的小基因的 转基因动物研究基因调控 基因治疗研究方面的应用： 通过基因剔除技术可将正常基因或有治作用 的基因引人病变细胞中，取代原来异常的基因或对 缺陷基因进行精确改正，使修复后的细胞表达正常 蛋白，不再表达错误产物；还可通过基因剔除技术去 除多余的、过量表达的、影响正常生理功能的基因以 达到治疗目的。 药学研究方面的应用 : 应用实验动物进行药 物筛选，是现代医药学发现药物的主要途径,尤其是 整体动物的病理模型。建立重大疾病，疑难疾病以 及与中医“病证”相对应的动物模型是药物筛选的长 期重要任务。然而传统的动物模型由于选用与人类 某种疾病有着相似症状的动物，其致病原因、机制常 不尽相同，因此导致筛选结果有时具有不确定性，试 验结果与临床结果不一致，且价格昂贵。生物转基 因技术和基因剔除技术的发展，为建立动物病理模 型提供了有利的条件，可建立敏感动物品系及与人 类疾病相同的动物模型用于药物筛选，可以从整体 水平直观反映出药物的治疗作用、不良反应及毒性 作用，真正体现目的基因的活动特征。避免了传统 动物模型上述缺点。 人类器官移植方面的应用:众所周知，器官移 植已成为许多终末期疾病首选的治疗方法。 导入人基因具特殊用途的猪和小鼠 生产用于人体器官移植的动物器官 生产可用于人体器官移植的动物器官（异源器官移植）可能是解决世界范围内普遍存在的器官短缺的有效途径，目前对器官供体动物研究较多的是猪。猪作为人类器官移植的供体动物有以下一些优势：妊娠期短，产仔数多，后代生长快，而且不存在伦理方面的问题。更重要的是猪的不同发育时期的器官，诸如心脏、肾等与不同年龄的人体器官大小上比较接近，极有可能代替病人的某些器官。 克隆猪，器官移植 克隆猴，研究疾病的模型 利用模式生物研究的意义 1. 生物的多样形式在进化过程中形成的，不同的生物有不同的形态结构和生理特征，但对生命活动有重要功能的基因却是高度保守的。因此，可从模式生物着手，先弄清楚低等生物的相对比较简单的基因组和生理功能，再以此为基础进一步研究人体这一复杂系统。比如，克隆低等生物的基因和阐明其功能后，将有助于克隆与该基因有同源序列的人体基因，并推测其可能的生理功能。 2. 在很多情况下不可能用人直接进行试验。比如设法破坏某一个基因或转入某一个基因，观察这样做对生物体的发育、生长、寿命和健康会产生什么样的后果，这只能在实验动物身上进行。因此也就的研究这些实验动物的基因组。 百奥赛图 北京百奥赛图基因生物技术有限公司2013年1月12日晚7点多称基因敲出模式大鼠正式完成，可以进行咨询并订购所需模式大鼠。 大鼠 ACI大鼠 Rat (Rattus Norvegicus) 大鼠 制备模式小鼠过程 设计一种打靶载体，然后把打靶载体引入到胚胎干细胞中对靶基因进行修饰（敲除或敲入），然后将基因“修饰”后的胚胎干细胞移植入小鼠的早期胚胎。再由嵌合体小鼠繁殖出带有