气相色谱分析.pptx

;;何为色谱法？ 20世纪初，俄国植物学家茨维特（Tsweet）将碳酸钙放在竖立的玻璃试管中，从顶端倒入植物色素的石油醚萃取液，并用石油醚冲洗，在管的不同部位形成了色带，每个色带代表不同的色素物质。这类方法被称为色谱法。随着色谱法的发展，不仅用于有颜色的物质分离，而且大量用于无色物质的分离。虽然“色”已失去了意义，但色谱法名称一直沿用至今。;固定相——CaCO3颗粒 流动相——石油醚 ;30、40年代相继出现了纸色谱和薄层色谱。 50年代气相色谱法兴起，把色谱法提高到“分离”与“在线分析”的新水平，奠定了色谱分析的理论基础。 1957年诞生了毛细管色谱分析法。 60年代推出了气相色谱-质谱联用技术（GC/MS），有效的弥补了色谱定性能力差的弱点。 70年代高效液相色谱法崛起，为难挥发、热不稳定和高分子样品的分析提供了有效手段。 80年代初出现了超临界流体色谱法（SFC），兼有GC和HPLC的特点。 80年代末，飞速发展起来的高效毛细管电泳色谱（HPCE），其柱效更高，对生物大分子的分离具有独特优势。; ① 按两相所处的状态分类： 　　流动相使用气体（如氮气、氢气或氦气等）的色谱法称之为气相色谱法（GC），流动相使用液体（如甲醇、乙腈等）的色谱法为液相色谱法（LC）。 ; ② 按固定相形状分类： 柱色谱 — 固定相装在柱管内，又分为填充柱或毛细柱； 纸色谱 — 利用滤纸作为固定相，样品溶液在纸上展开进行分离； 薄层色谱 — 将固定相研成粉末，再压成薄膜。 ;③ 按分离过程的机制分类： 　　吸附色谱—利用吸附剂表面对不同组分物理吸附性质的差别进行分离； 　　分配色谱—利用不同组分在两相中分配系数不同进行分离； 　　离子交换色谱—利用组分的离子交换能力不同来进行分离； 　　空间排斥色谱—利用分子尺寸不同进行分离（凝胶色谱） 。;空间排阻色谱法 ;色谱理论;　　示意图中有A、B两种组分，固定相对A组分的吸附（或溶解）能力小于B组分，A组分则从色谱柱中率先流出。;塔板理论的假设： (1) 在每一个平衡过程间隔内，平衡可以迅速达到； (2) 将载气看作成脉动（间歇）过程； (3) 试样沿色谱柱方向的扩散可忽略； (4) 每次分配的分配系数相同。; 色谱柱长：L， 　　虚拟的塔板间距离：H， 　　色谱柱的理论塔板数：n， 则三者的关系为： n = L / H 理论塔板数与色谱参数之间的关系为：;2. 有效塔板数和有效塔板高度;3.塔板理论的特点和不足;二、速率理论-影响柱效的因素;A─涡流扩散项;B/u —分子扩散项;k为容量因子； Dg 、DL为扩散系数。 减小担体粒度，选择小分子量的气体作载气，可降低传质阻力。;2.载气流速与柱效——最佳流速;3. 速率理论的要点;讨论：;分离度的表达式：;气相色谱法针对性及特点;气相色谱仪构成（五部分）;自动进样系统;安捷伦aligent 7890;气相色谱仪的基本流程;气源和流量调节系统;进样系统;;样品与载气混合;气化室（室温~400°C） 样品进样后要有足够的气化温度，使样品组分瞬间气化后被载气带入色谱柱中。在保证样品组分不分解的前提下，适当提高气化温度有利于组分分离和定量分析，尤其在进样量比较大时更是如此。 气化室温度设定： 依据样品中沸点最高的组分来设定。同时要求气化室温度比色谱柱温高30~70°C;影响色谱分离的因素？ 进样量和进样速度会影响色谱柱分离效果和分析结果。 进样量影响： 进样量过大会造成色谱柱超负荷,多组分色谱峰重叠，分离效果差；进样量过少，又会使含量低的组分因检测器灵敏度不够而不出峰。最大允许的进样量应控制在峰高或峰面积与进样量呈线性关系的范围内。 液体样品进样量：0.1~5?l 气体样品进样量：0.1~10ml 进样速度的影响： 进样速度慢则会使色谱峰形加宽，影响分离效果。 一般要求：进样时做到进样迅速和定量准确。;分离系统;分离系统;;毛细柱 石英玻璃管材，也有使用不锈钢管材的报道，但非常罕见。 柱长度：20~60m 柱内径：? 0.2~0.53mm 进样量：0.01~0.2?l;填充柱与毛细柱分离效果比较;2、固定相及其选择;色谱柱选择原则;④ 对于易形成氢键的样品：如醇、酚、胺和水等的分离，一般选择极性或氢键性的固定液，这时样品中各组分按固定液分子间形成氢键的能力大小先后流出，不易形成的先流出，最易形成氢键的最后流出。　;气相色谱分离过程;1、色谱柱温度：提高柱温可减小气相、液相传质阻力，改善色谱柱