实验十一蛋白质及氨基酸的呈色反应.pptVIP

实验八 蛋白质的性质实验（一） 蛋白质及氨基酸的呈色反应  1.了解构成蛋白质的基本结构单位及主要连接方式 2.了解蛋白质和某些氨基酸的呈色反应原理 3.学习几种常见的鉴定蛋白质和氨基酸的方法 （一）双缩尿反应 1.实验原理 尿素加热至1800C左右，生成双缩尿并放出一分子氨。双缩尿在碱性环境中能与Cu2+结合生成紫红色化合物，此反应称为双缩尿反应。 蛋白质分子中含有肽键，其结构与双缩尿相似，也能发生此反应。可用于蛋白质的定性或定量测定 反应式 双缩脲反应不仅为含有两个以上肽键的物质所有。含有一个肽键和一个—CS—NH2，—CH2—NH2， —CRH—NH2，—CH2—NH2—CHNH2—CH2OH或 —CHOHCH2NH2等基团的物质以及乙二酰二胺等物质也有此反应。NH3也干扰此反应，因为NH3与Cu2+可生成暗蓝色的络离子Cu(NH3)42+。因此，一切蛋白质或二肽以上的多肽都有双缩脲反应，但有双缩脲反应的物质不一定都是蛋白质或多肽。 2.试剂 （1）尿素 10g (2) 10%氢氧化钠溶液 250 mL (3)1%硫酸铜溶液 60 mL （4）2%卵清蛋白溶液 80 mL 3.实验操作 取少量尿素结晶，放在干燥试管中。用微火加热使尿素熔化。熔化的尿素开始硬化时，停止加热，尿素放出氨，形成双缩脲。冷后，加10