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朊粒医学本科教材课件第一节 生物学性状第二节 致病性第三节 微生物学检查法第四节 防治原则重点难点1. 朊粒的含义。熟悉1. 朊粒的生物学特性;2. 朊粒的致病性;3. 朊粒病的共同特征。了解第一节生物学性状biological properties医学微生物学（第9版）一、朊蛋白的基因定位 1. 人类朊蛋白基因定位于第20号染色体 2. 小鼠朊蛋白基因定位于第2号染色体 3. 正常朊蛋白的生理功能尚不清楚，可能与细胞跨膜信号传导有关医学微生物学（第9版）二、正常朊蛋白和异常朊蛋白1. 正常的细胞朊蛋白（cellular prion protein，PrPC）（1）生理功能（2）分子构象：?螺旋（3）理化特性： ①对蛋白酶K敏感；②溶于去污剂。（4）致病性和传染性： 无。 此图为人卫体系的图片，PrPc与PrPsc的三维结构模式图（李凡 徐志凯 医学微生物学 第8版）医学微生物学（第9版）2. 异常朊蛋白——羊瘙痒病朊蛋白（scrapie prion protein, PrPSc） （1）分子构象：?螺旋（2）理化特性： ①对蛋白酶K不敏感；②不溶于去污剂。（3）致病性和传染性： 有。（4）PrPC转变为 PrPSc的因素： ①外源性朊粒侵入（见于传染性朊粒病）； ②体内PrP基因突变（见于遗传性朊粒病）； ③PrP的异常自发性折叠（见于散发性朊粒病）。 此图为人卫体系的图片，PrPc与PrPsc的三维结构模式图（李凡 徐志凯 医学微生物学 第8版）医学微生物学（第9版）（5）PrPC转变为 PrPSc的机制： ① 模板学说； ②核聚集学说（种子学说）（6）PrPC与 PrPSc的主要区别 区别要点： ①分子构象；②对蛋白酶K是否敏感；③对去污剂的溶解性；④存在部位；⑤有无致病性。医学微生物学（第9版）三、朊粒的本质、理化性状、细胞培养及动物感染模型1 .本质——异常折叠的朊蛋白（prion protein，PrP），电镜下呈纤维状或杆状。2. 理化因素对朊粒影响 （1）抵抗蛋白酶K的作用；（2）对热力作用的抗性； 灭活条件：压力蒸汽灭菌（134?C，?2小时）（3）对辐射、紫外线及常用的消毒剂也有很强的抗性。3. 朊粒的细胞培养及动物感染模型第二节致病性pathogenicity医学微生物学（第9版）1. 朊粒引起传染性海绵状脑病（transmissible spongiform encephalopathy，TSE） TSE的共同特点： （1）潜伏期长； （2）临床表现：亚急性、进行性经过，以痴呆、共济失调、震颤等中枢神经系统症状为主； （3）病理学特征：光学显微镜下可见脑部组织神经元细胞非炎症反应的空泡变性，星型胶质细胞增生，局部组织可见淀粉样斑块；大体观可见脑组织疏松呈海绵状； （4）免疫原性：弱，朊粒不能刺激机体产生特异性免疫应答。医学微生物学（第9版）2. 主要的动物和人类朊粒病动物朊粒病： （1）羊瘙痒病(scrapie)； （2）牛海绵状脑病（bovine spongiform encephalopathy，BSE）。人类朊粒病： （1）库鲁病（Kuru ）； （2）克-雅病（Creutzfeld-Jakob disease，CJD）; （3）变异型克-雅病（variant CJD，vCJD）。第三节微生物学检查法laboratory diagnosis医学微生物学（第9版）一、免疫学检查法1.免疫组化：确诊朊粒病最可靠的方法，可直接检出PrPC和PrPSc在脑组织中的分布。 2.免疫印迹：诊断朊粒病的常规检测方法，可用于脑组织PrPSc及脑脊液中生物标记物14-3-3蛋白的检测。 3.ELISA: 检测朊粒病致病因子的快速、简便方法，适用于脑组织匀浆液或脑脊液中的PrPSc及生物标记物 14-3-3蛋白大批量样品的筛查。二、分子生物学检查法1.基因分析: 包括PrPSc基因的PCR，限制性酶切分析和测序等，主要用于协助诊断遗传性朊粒病。2.蛋白质错误折叠循环扩增( PMCA)：灵敏度高，可用于血液等体液中PrPSc的检测。 3.实时振荡诱变实验: 快速且灵敏度高，可用于血液等体液中微量PrPSc的检测，有望用于人类CDJ的早 期诊断。第四节防治原则treatment, prevention and control 医学微生物学（第9版）1.医源性朊粒病的预防 对病人的血液、体液及手术器械等进行灭菌，彻底销毁含病原因子的动物尸体、组织块或注射器。严禁朊粒病及任何退行性中枢神经系统疾病病人的组织和器官用于器官移植。医护人员及实验室研究人员应严格遵守病原微生物实验室生物安全操作规程。2.BSE及vCJD的预防禁止用牛、羊等反刍动物的骨肉粉作为饲料添加剂喂养牛、羊等，以