核酸凝胶电泳.pptVIP

核酸凝胶电泳 引言： 核酸是带均匀负电荷的生物大分子，在电场中向正极移动，不同大小和构象的核酸分子的电荷密度大致相同，在自由泳动时，各核酸分子的迁移率区别很小，难以分开。以适当浓度的凝胶介质作为电泳支持介质，具有分子筛效应，使得分子大小和构象不同的核酸分子泳动率出现较大差异，达到分离的目的。此为分离、鉴定、纯化核酸片段的标准方法。用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙锭（EB）进行染色，可直接在紫外灯下确定DNA在凝胶中的位置。 影响核酸电泳的因素： 1．核酸的性质 2．凝胶孔径的大小 3．电场强度和电场方向 4．电泳环境 缓冲液的组成和离子强度直接影响迁移率。 核酸电泳的指示剂 ： 核酸电泳常用的指示剂有两种： ⑴溴酚蓝 ⑵二甲苯青， DNA的琼脂糖凝胶电泳 引言：琼脂糖主要从海洋植物琼脂中提取来的，为一种聚合线性分子，一般含有多糖、蛋白质和盐等杂质，杂质的含量每个厂商和批号的产品不尽相同。对DNA电泳迁移率的影响也不一样，经化学修饰后熔点降低的琼脂糖叫低熔点琼脂糖，其机械强度无明显变化，主要用于DNA的限制酶原位消化、DNA片段回收以及小DNA片段（10～500 bP）的分离。琼脂糖凝胶的孔径取决于琼脂糖的浓度。 【实验目的】 掌握DNA琼脂糖凝胶电泳的原理和操作方法。 【实