生物医用高分子材料第五章.pptVIP

5.3高分子材料在诊断生物传感器中的应用 5.3高分子材料在诊断生物传感器中的应用 5.3高分子材料在诊断生物传感器中的应用 检体检查，是对生物体内的血液、尿、髓液或组织细胞等进行的检查。微粒子（Microspheres）应用于检体检查。 1． 一般检查：尿检（如尿素、尿酸、肌肝等）。 2． 血液学检查：血液凝固特性检查和血球检查。 3． 生化学检查：蛋白质、酵素、脂质、糖质，以及无机质等的检查。 临床上检体检查的分类： 4． 免疫学（血清学）检查：抗原抗体反应、补体结合反应等。血中和尿中的荷尔蒙检查。 5． 细菌学检查：病原性微生物的培养及检查。 6． RI检查：使用放射性同位素的检查。 　微粒主要应用于免疫学的检查（Immunological test） 临床上检体检查的分类： 诊断用微粒的材料 　　诊断用微粒是检查试剂的一种，反应对象是体液（血清-serum，血浆-plasma，尿-urine）或细胞。素材粒子一般不直接使用，通常是将抗原或抗体等固定在这些粒子表面后使用。固定后的抗原或抗体与检测液中的对象物质或细胞发生反应，从而达到测定的目的。 1 诊断用微粒的担体的必要性质 担体必须的性质： (1) 首先是能够与抗原或抗体发生反应，从而能够固定抗原或抗体； (2) 其次是分散性。 其它性质： 着色性，粒度均匀性等也非常重要； 　　根据用途而必须的性质：沉淀速度适当，从液体中容易分离。 　一是生物由来的微粒子，即细胞； 　二是合成高分子微粒子：包括聚苯乙烯（PS），改性的聚苯乙烯和2-羟乙基甲基丙烯酸（HEMA）体系的高分子粒子。 诊断用微粒子来源： 生物由来的微粒 主要是细胞。 血液中红细胞的凝聚原理测定血型。 　ABO血型鉴定 　ABO blood groups ??? 取静脉血少许，放入生理盐水中混匀，配成2%红细胞原液 【正常参考值】 ??? 根据红细胞膜上的A、B凝集原和血清内抗A、抗B凝集素的不同，将红细胞血型分为O、A、B、AB四型。 【异常结果分析】 　用标准血清及标准红细胞鉴定ABO血型结果 聚苯乙烯及改性聚苯乙烯微粒 聚苯乙烯微球是目前比较常用的微粒测定试剂。 乳液聚合得到的单分散性聚苯乙烯（PS）微球。 聚苯乙烯微粒的制备 用乳液聚合的方法合成：乳化剂存在的情况下合成。 以聚乙烯吡咯烷酮为分散剂，无水乙醇为反应介质，偶氮二异丁腈为引发剂，采用分散聚合工艺，制备粒径为5μm单分散（分散系数≤5％）聚苯乙烯微球。 其他类型的粒子 HEMA 粒子。固定蛋白质。 PGMA粒子。 高分子微球的制备方法 高分子成球； 单体聚合成球 高分子亲和微球的制备方法 免疫学方面的应用 诊断用微粒子，以前主要用于免疫学的检查，目前其应用范围扩大。诊断用微粒子是检查试剂，与体液或细胞发生作用，而进行诊断。素材微粒子一般不单独使用，通常是将抗原（antigen）、抗体（antibody）等固定在素材微粒子上使用。素材微粒子通常称为担体。 免疫学的凝聚实验。抗原 + 抗体 ? 凝聚 抗原的分类 天然抗原 根据抗原性物质与机体的亲缘关系可分为“自己”（self）与“非已”（non-self）抗原。即与机体种系发生关系愈远，其遗传性差异越大，其免疫原性也愈强。 抗原的分类 合成抗原 用化学合成法或基因重组法制备含有已知化学结构决定簇的抗原，称之为人工抗原。它可包括人工结合抗原、人工合成抗原和基因重组抗原。 将无免疫原性的简单化学基团与蛋白质载体偶联，或将无免疫原性的有机分子如二硝基苯（DNP）或三硝基苯（TNP）与蛋白质载体结合，形成载体-半抗原结合物，均属人工结合抗原。 用化学方法将活化氨基酸聚合，使之成为合成多肽，只由一种氨基酸形成的聚合体称为同聚多肽，如由左旋赖氨酸形成的共同聚多肽（PLL）。 基因工程抗原 有可能将编码免疫原性氨基酸序列的基因克隆化并与适当载体（如细菌粒或病毒）DNA分子相结合，然后引入受体细胞中（如原核细胞的大肠杆菌或真核细胞酵母菌及哺乳类动物细胞）使之表达，即能获得免疫原性之融合蛋白，经纯化后可做为疫苗，此即基因工程疫苗。 抗单纯疱疹病毒（HSV）抗体 干式化学分析 干式化学分析法在血液检查及普通的定性检测中具有重要意义。与溶液化学分析法相对应，具有操作更加简捷的优点。 典型的干式化学检查法，就是大家知道的试纸法。大家知道的是试纸法测定pH值，同样的方式在血液检查中也使用试纸法。如果试纸法能够直接测定如各种肝炎、爱滋病等，那将对社会具有重大意义。 化学灭菌指指示卡 诊断用试药 诊断用高分子试药主要是酵素(即酶)。酵素是通过发生生物化学反应而得到的物质，与化学试药不同。 比化学试药具有优势。酵素试药检测，即酵素分析法在临床上已