生化工程进展 发酵过程优化与控制.ppt

(b)利用DNA重组技术对酿酒酵母糖酵解途径中的一个或多个被认为是限速步骤的酶进行修饰，分别构建了这些关键酶高活力的菌株，但是也没有观察到乙醇产率及细胞生长速度的显著变化，这表明通过增加基因拷贝数提高某一特定酶表达量的方法，同样不能有效提高目标代谢流 (c)酿酒酵母色氨酸合成途径中限速酶的控制系数很小，即使限速酶超量表达，仍然不能有效提高色氨酸的合成速率，而且随着酶活力的增加，限速酶对代谢流的控制能力反而趋于减小 (d) 在移动发酵单胞菌中，利用基因重组技术提高ED途径中被推断为控制代谢流的酶的表达活性，不仅没有提高整个代谢途径的代谢流，反而显著降低了糖酵解途径的代谢流和菌体生长速率 ②分析技术。在获得大量生化反应基本数据的基础上，采用化学计量学、分子反应动力学和化学工程学的研究方法并结合先进的计算机技术，可以进一步阐明细胞代谢网络的动态特征与控制机理，以确定代谢途径改造的思路。 　　这些分析手段包括能准确测定细胞内代谢流的稳态法、展示代谢流控制过程的扰动法、简化复杂代谢网络的组合法以及代谢网络优化技术等。 例如: （1）Seressiotis 等提出的MPS(Metabolic Pathway Synthesis)体系可系统地构建生化途径，从而推测出产物的可能途径； （2) Mavrovouniots 等利用计算机辅助设计生化途径，将计算出的最大理论转化率与代谢途径中诸多