尿亚小酸盐定性测定干法学法作业指导书11.doc

尿亚硝酸盐定性测定干法学法作业指导书 1. 实验原理 基于尿液中革兰氏阴性细菌将硝酸盐转化成亚硝酸盐的原理。 2. 标本采集 2.1 标本采集前病人准备：以清晨第一次尿为宜，急诊患者可随时留取。 2.2 标本种类：新鲜尿液 2.3 标本要求：采集患者尿液标本时，盛尿液的容器必须清洁干燥，要求留取中段尿。 3. 标本储存：从排出到检测应在2小时内完成。如不能及时送检或分析，应置4℃下冷藏保存，但冷藏时间不得超过6小时。 4. 标本运输：室温运输。 5. 标本拒收标准：细菌，经血，白带，精液，粪便污染标本不能作测定。 6. 试剂 6.1 试剂名称 Combur10 TestR M 6.2 试剂厂家 德国 Roche 诊断试剂公司 6.3 包装规格：100Test/kit 6.4 试剂盒组成：试纸条：100条 6.5 试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存于2-30℃条件下，可使用至试剂盒所标示有效期。 7. 仪器设备 7.1 仪器名称：罗氏尿液分析仪 7.2 仪器厂家：Roche 7.3 仪器型号：MiditronR Junior II 7.4 仪器校准程序：在使用过程中，一般是两周校准一次，如超过此期限，仪器会提示“Please Calibrate”（请校准）。通过测定内部参比块，环境温度和光学系统的改变都可被补偿。当条件改变很大时，比如参比块腐蚀或发光二极管的亮度变暗，仪器将打印出一个错误信息；校准条是有稳定特征的灰白色试条，这些校准条只能使用一次。校准前，应先清洁试纸托盘与运输臂。步骤为：在“READY—START”显示时，按Calibrate键，放上校准条。再按Calibrate键，校准条被送入机器内，屏幕显示“Calibrating”（正在校准），约一分钟后，标准结果将被打印出。“Calibrating O.K”，表示校准成功。 8. 操作步骤： 8.1 按START键，显示“Prepare Strip”,此时试条筒中拿出试条。 8.2 约4秒钟后，显示“Dip Strip 1”，同时绿灯闪烁，将试条浸入尿样中。 8.3 当显示“Insert Strip 1”,把试条放在试条托盘上，此时绿灯亮，若要人工输入颜色，按Color键，再按Set键，选择相近的颜色，最后按Enter键确认，同样也可人工输入浊度。 8.4 约20秒后，显示“Dip Strip 2”，然后重复以上过程。 每一个测量完成后将自动打印出结果。 9. 结果判断：粉红色斑点或粉红色反应为阳性结果。 10. 质量控制：质控尿液的应用：用人工质控尿液进行空内质控，低浓度质控液亚硝酸盐应为（-），高浓度质控液亚硝酸盐应为（+）。 11. 参考范围：阴性 12. 临床意义：阳性结果提示尿液中存在革兰氏阴性细菌，并提示尿中所存在的细菌数目在10 5个/ml以上。 13. 操作性能：快速简便，特异性强，灵敏度高，重复性好。 14. 方法局限性 14.1 粉红色反应为阳性结果，并提示尿中所存在的细菌数目在10 5个/ml以上，但颜色的强度与所存在的细菌数不成正比例关系。 14.2 阴性结果并不表示尿液中无细菌存在，阴性结果可见于非硝酸盐转化型细菌的尿路感染。当尿液在膀胱内储留时间不足4小时以上以便使硝酸盐被还原，或者饮食中缺乏硝酸盐，尽管尿液中所存在之细菌含有还原酶，其试验结果也可能为阴性。 14.3 高比重的尿液可降低亚硝酸盐试验的灵敏度。对于含有少量亚硝酸盐（等于或少于13?mol/L）的样本，尿液中的维生素C浓度等于或大于1.42mmol/L时可产生假阴性结果。 15. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系仪器厂家，进行紧急修理，如一时 不能修好，如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先测，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台能正常工作的仪器代替。