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基因工程操作工具1 1、基因工程的 指“ 限制性核酸内切酶 ” 主要存在于微生物 一种限切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定切点切割DNA分子 已发现的有200多种 种类: 来源: 特点: “ ” 作用于: 磷酸二酯键 限制性内切酶(EcoRⅠ)作用过程 点击播放 被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端? 思考: 形成的黏性末端不同 不同的限制酶呢? 具有 2、基因工程的 指“DNA连接酶” “ ” 作用: 将互补配对的两个粘性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子 DNA连接酶的作用过程 点击播放 DNA连接酶的作用位点是:相邻的两个脱氧核苷酸的切口。即生成:磷酸二酯键。 3、基因的运载体 (2) 条 件 ①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存 ②具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接 ③具有标记基因,便于进行筛选 (3)常用 的运载体: 质粒、噬菌体和动、植物病毒等 (1)运载体的概念 标记基因,便于进行检测。 其中质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子. (4)它们的共同特点是 都有侵染或进入宿主细胞的能力 练习题 下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体 ( )A.细菌质粒 B.噬菌体 C.动植物病毒 D.细菌核区的DNA 在基因工程中,切割载体和含有目的基因的DNA片段中,一般需使用 ( )A.同种限制酶 B.两种限制酶 C.同种连接酶 D.两种连接酶 下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件 ( )A.具有某些标记基因 B.决定宿主细胞的生存C.能够在宿主细胞中复制 D.有多个限制酶切点 水母发光蛋白由236个氨基酸构成,其中有三种氨基酸构成发光环,现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中,这种蛋白质的作用( )A.促使目的基因导入宿主细胞中 B.促使目的基因在宿主细胞中复制C.使目的基因容易被检测出来 D.使目的基因容易成功表达 * *
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