病原学检查1资料.doc

病原学检查 C.1粪便检查 C.1.1尼龙绢袋集卵孵化法 操作步骤：取受检者粪便约30g，先置于40目～60目/25.4mm的铜丝筛中，铜丝筛置于下口夹有铁夹的尼龙绢（260目/25.4mm）袋口上，淋水调浆，使粪液直接滤入尼龙绢袋中，然后移去铜丝筛，继续淋水冲洗袋内粪渣，并用竹筷在袋外轻轻刮动助滤，直到滤出液变清。取下夹于袋底下口的铁夹，将袋内沉渣淋入三角烧瓶。如需加做沉淀镜检，可在烧瓶中吸取沉渣3滴～4滴放在载玻片上，抹成涂片，涂面应占载玻片面积的2/3。涂片的厚度以能透过涂片尚能看清印刷字体为标准，将涂片置于低倍显微镜下检查。全片镜检时间不宜少于2min，每份粪便至少检查两张涂片，镜检时应仔细识别血吸虫卵和其他蠕虫卵。然后将盛有粪便沉渣的三角烧瓶加水至离瓶口1cm处，放入孵化室（箱）或在室温下孵化。一定时间后取出烧瓶，观察毛蚴。一般需观察2次～3次，观察时间随温度高低而不同。温度高时孵出较早；温度低时毛蚴孵出迟。气温超过30℃时，第1次观察可在0.5h～1h后进行，阴性者可在4h后观察第2次，8h观察第3次，3次均为阴性者，判作阴性结果；气温在26℃～30℃时，可在孵化后4h开始观察，阴性者8h及12h再观察1次；气温在20℃～25℃时，则可在8h后观察第1次，12h后观察第2次；如利用自然气温孵化，一昼夜之间的气温悬殊，可在操作后的次晨再观察1次。一般室温在25℃以上时，可利用自然气温孵化，无需加温。 观察毛蚴时，应将烧瓶向着光源，并衬以黑纸板。要注意毛蚴与水中原生动物的区别。如有怀疑，可用毛细吸管吸出，在显微镜下鉴别。 C.1.2改良加藤厚涂片法 操作步骤：置尼龙绢片（80目～100目/25.4mm）于受检粪样上，用软性塑料刮片在尼龙绢片上轻刮，粪便细渣即由绢片微孔中露至绢片表面。将定量板（3cm×4cm×2.5mm，板中圆孔的孔径为3.5mm，刮平后，孔中可容粪量41.7mg）放在载玻片中部，以刮片从尼龙绢片上刮取细粪渣填入定量板的中央孔中，填满刮平。小心提起定量板，粪样即留在载玻片上。取一张经甘油-孔雀绿溶液浸渍24h的亲水性玻璃纸（30 mm×30mm），盖在粪便上，用橡皮塞或另一块载玻片覆于玻璃纸上轻压，使粪便均匀展开至玻璃纸边缘。编号后置于25℃室温，相对湿度75%下过夜，镜检。否则会因透明过度而漏检。每份粪样至少需做2张涂片，以镜检每片平均检出的虫卵数乘以24即为1g粪便中的虫卵数（EPG）。 C.1.3集卵透明法 操作步骤：将粪便充分搅匀后，取5g置于搪瓷杯中，加水调成粪液。把粪液通过60目/25.4mm的铜丝筛淋水滤入2只套叠在一起的尼龙袋中（袋深20cm?，袋口直径8cm，外袋260目/25.4mm，内袋120目/25.4mm）。然后移去铜丝筛，继续淋水冲洗袋内粪渣，并把袋轻轻振荡，使加速过滤，直至滤出液变清为止。用药勺刮取外袋内全部沉渣，分作涂片。 在沉渣图片上，覆盖经甘油-孔雀绿溶液浸渍24h的亲水性玻璃纸（2cm?×5cm），以玻片压匀，置室温中过夜，次日镜检。以全部沉渣获得的虫卵数相加，再除以5得出每克粪便中虫卵数（EPG）。 C.2直肠活组织检查 按医院常规进行。本法可用于医院和血防站内对疑似病人的诊断，不宜用于普查。 附录D