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和任何人呵呵呵
课题3 血红蛋白的提取和分离
1.下列试剂可用于血红蛋白释放的是( )
①0.9%的生理盐水 ②甲苯 ③磷酸缓冲液 ④蒸馏水 ⑤柠檬酸钠
A.②④ B.①④
C.④⑤ D.①③
解析:0.9%的生理盐水是洗涤红细胞是应用的试剂,不能用于血红蛋白释放;甲苯的作用是溶解细胞膜的磷脂,加速血红蛋白的释放;磷酸缓冲液用于粗分离蛋白质,不能用于释放血红蛋白;蒸馏水作用是使红细胞吸水胀破,释放其中的血红蛋白;柠檬酸钠的作用是采血时,防止血液凝固,不能用于血红蛋白的释放。
答案:A
2.在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽,与其有关的是( )
A.凝胶色谱柱的制作 B.色谱柱的装填
C.洗脱过程 D.样品的处理
解析:在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽,说明色谱柱制作不成功,可能是凝胶装填不紧密、不均匀,或者存在气泡,打乱了洗脱次序所致。
答案:B
3.下列有关“血红蛋白提取和分离”实验的正确叙述是( )
A.用蒸馏水进行红细胞的洗涤,其目的是去除细胞表面的杂蛋白
B.将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较大的杂质
C.血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂
D.整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构
解析:对红细胞洗涤时应该用生理盐水,不能用蒸馏水,A错误;将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较小的杂质,B错误;血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是溶解磷脂,加速血红蛋白的释放,C错误;整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持pH相对稳定,防止和血红蛋白的结构发生改变,D正确。
答案:D
4.凝胶色谱柱取长为40 cm,内径为1.6 cm,有关说法中,不正确的是( )
A.一般凝胶色谱柱直径的大小不会影响分离的效果
B.凝胶色谱柱过高,超过1 m,不影响分离的效果
C.凝胶色谱柱过矮,则影响混合物的分离度
D.凝胶色谱柱直径过大会耗用过多洗脱液,样品的稀释度过大
解析:一般凝胶色谱柱直径的大小不影响分离的效果,但是直径过大会造成洗脱液体积增大,样品的稀释度过大,因此应选择直径不超过2 cm的色谱柱。凝胶色谱柱的高度与分离度有关,一般不超过1 m。
答案:B
5.下图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置,请据图分析回答下列问题:
(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有________功能。
(2)甲装置用于________,目的是去除样品中__________的杂质,图中A是__________。B是__________溶液。
(3)用乙装置分离蛋白质的方法叫________________,是根据________________分离蛋白质的有效方法。
(4)乙装置中,C是____________,其作用是_______________。
(5)用乙装置分离血红蛋白时,待__________________________时,用试管收集流出液,每5 mL收集一管,连续收集6管,图中试管序号表示收集的先后。经检测发现,试管②和试管⑤中蛋白质含量最高,则试管⑤中的蛋白质相对分子质量比血红蛋白________(填“大”或“小”)。
解析:(1)血红蛋白能携带氧气,体现了蛋白质具有运输功能。(2)甲装置为透析装置,目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质。其中A是磷酸缓冲液,B是血红蛋白溶液。(3)乙装置分离蛋白质的方法叫凝胶色谱法,是根据蛋白质的相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法。(4)乙装置中,C溶液为磷酸缓冲液,作用是洗脱血红蛋白。(5)待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,用试管收集流出液,每5 mL收集一管,连续收集。最先收集到的蛋白质是血红蛋白分子,则试管②内的大量蛋白质为血红蛋白。由于试管⑤晚于试管②收集得到,因此其内收集到的蛋白质比血红蛋白分子移动速度慢,其相对分子质量比血红蛋白小。
答案:(1)运输 (2)透析(粗分离) 相对分子质量较小 磷酸缓冲液 血红蛋白 (3)凝胶色谱法 相对分子质量的大小 (4)磷酸缓冲液 洗脱血红蛋白 (5)红色的蛋白质接近色谱柱底端 小
A级 基础巩固
1.使用凝胶色谱法分离蛋白质实验中,相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程,可表示为下图中( )
解析:凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部通道,路程较长,移动速度较慢;相对分子质量大的蛋白质,路程较短,移动速度较快,首先洗脱出来。
答案:B
2.使用SDS—聚丙烯酰胺电泳的过程中,不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于( )
A.电荷的多少 B.分子的大小
C.肽链的多少 D.分子形状的差异
解析:SDS
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