分子生物学13转录后的基因表达调控.ppt

五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （2）核mRNA前体的剪接 选择性剪接（alternative splicing） 选择性剪接还可有重要的生物学效应，如在果蝇的性决定体系中起重要的作用 果蝇的性决定中，有3个基因进行选择性剪接 Sex lethal (Sxl) transformer (tra) doublesex (dsx) Alternative splicing cascade in Drosophila sex determination 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （3）自剪接的内含子（self-splicing introns） 最初由Thomas Cech等人在四膜虫(Tetrahymena) 的26S rRNA基因中发现 该基因转录的rRNA前体有1个内含子，而其剪接不需要剪接体，也不需要任何蛋白质的帮助，因此是一种自剪接 Self-splicing of group I introns 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （3）自剪接的内含子（self-splicing introns） 自剪接的内含子在核rRNA基因、细胞器基因和原核基因中都存在 根据这些内含子的二级结构（保守序列）及剪接机制，可把它们分为 I 类内含子（group I introns）和 II 类内含子（group II introns） 自剪接内含子的发现导致“ribozyme”（核酶）这一概念的提出 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （3）自剪接的内含子（self-splicing introns） I 类内含子 一般都是核rRNA基因的内含子（主要在纤毛虫中） 还有一些是线粒体基因、叶绿体基因及细菌基因的内含子，在体内也进行自剪接 The three-dimensional structure of the Tetrahymena group I intron 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （3）自剪接的内含子（self-splicing introns） I 类内含子的剪接机制 Step 1：外源鸟苷酸（GTP）的羟基进攻内含子 5’端的A（连结UA的磷酸二酯键），释放出5’外显子（外显子1），并形成一中间产物 Step 2：5’外显子3’端的羟基进攻3’外显子（外显子2）5’端的磷酸二酯键，使5’外显子与3’外显子连结起来，并释放出内含子 Self-splicing of Tetrahymena rRNA precursor 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （3）自剪接的内含子（self-splicing introns） II 类内含子 主要存于线粒体基因、叶绿体基因及细菌基因中，在体外条件下可自剪接，在体内往往有蛋白质参与剪接 剪接机制与核mRNA内含子的有很大的相似性（形成套环中间产物等） The structure and self-splicing pathway of group II introns Comparison of the active center of a spliceosome and that of a group II intron EBS: Exon Binding Site; IBS: Intron Binding Site 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （3）自剪接的内含子（self-splicing introns） II 类内含子 总体上，剪接过程与剪接体的很相似：内含子本身的序列代替了U1、U2、U4、U5、U6 实际上，核mRNA内含子（包括参与剪接的snRNA）与II 类内含子是有进化关系的 Three classes of splicing reactions 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （4）tRNA剪接（tRNA splicing） 核tRNA内含子 内含子较小（10 bp左右），且只有1个，一般在相应于反密码子的碱基附近（与反密码子的 3’端隔1个核苷酸） Tertiary structure of yeast tRNA precursors 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （4）tRNA剪接（tRNA splicing） 分2步进行，需要tRNA内切酶及RNA连接酶的参与 Step 1：由剪接内切酶把内含子切除 Step 2：由RNA连接酶把两个外显子连接起来 Three classes of