基于微流控荧光定量PCR的MRSA快速检测技术研究.PDFVIP

论 著 2014年  第20卷   第2期 基于微流控荧光定量PCR的MRSA 快速检测技术研究 1 1，2 1 1 1 1，2 1，2 1 李阳 　朱灵 　朱灿灿 　赵树弥 　张龙 　邓国庆 　刘勇 　王安 （1.中国科学院安徽光学精密机械研究所，安徽合肥　230031 ；2. 中科院皖江新兴产 业技术发展中心，安徽铜陵　244000 ） [ 摘　要 ]　针对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA ）检测的问题，发展一种基于微流控荧光 定量PCR 的致病菌快速检测新技术。采用光刻法制作了微流控PCR 芯片，研制了集成高性能 温度控制模块和高灵敏度荧光检测模块的微流控荧光定量PCR 分析系统。通过检测特异性基 因femA 和mecA 对MRSA 进行快速鉴别。实验结果表明，使用微流控PCR 芯片可以成功实 现MRSA 特异性基因的快速检测，相对传统的管式PCR ，芯片使用6 µL 试剂在56 min 完成了 MRSA 特异基因的检测，不仅节约了反应试剂，而且极大提高了检测速度。该技术可扩展到其 他致病菌的检测，具有良好的应用前景。 [ 关键词 ]　微流控芯片；荧光定量PCR ；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；快速检测 中图分类号：TB99　R378.1　文献标识码：A　文章编号：2055-5200（2014）02-006-03 DOI：10.11876/mimt201402002 Rapid detection of MRSA using microfluidic real-time PCR LI Yang1 ZHU Ling1,2 　 ， ， ZHU Can-can1 ，ZHAO Shu-mi1 ZHANG Long1 DENG Guo-qing1,2 LIU Yong1,2 WANG ， ， ， ， An 1. 1.Anhui Institute of Optics and Fine Mechanics, Chinese Academy of Sciences, Hefei （ 230031, China 2.Wanjiang Center for Development of Emerging Industrial Technology, ； Chinese Academy of Sciences ,Tongling 244000, China ） [Abstract]　For Methicillin-resistant Staphylococcus Aureus (MRSA) identification, a new rapid detection technology of pathogenic bacteria was developed using microfluidic real-time PCR. The detection was conducted on a microfluidic chip fabricated through soft lithography method. A microfluidic real-time PCR analysis system which integrated a high-performance temperature control ， module and a high-sensitivity fluorescence detection unit was developed. Specific genes femA and ， mecA are amplified on a microfluidic chip for fast identification of MRSA. The experimental results showed that the microfluidic PCR chip cou