2017-2018学年高二生物（选修3）同步：动物细胞工程.pptVIP

第二节 动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体制备 细胞核移植 动物细胞工程技术 动物细胞工程的基础 是指从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 （二）、原理 细胞分裂增殖 动物细胞培养 幼龄动物 剪碎组织 原代细胞培养 取动物器官 和组织 细胞悬浮液 传代细胞培养 胰蛋白酶处理 单个细胞 胰蛋白酶处理 单个细胞 归纳过程 取 的组织、器官 细胞悬浮液 酶 贴满瓶壁的细胞 单个细胞 加入 液 动物胚胎或幼龄动物 胰蛋白 培养 接触抑制 原代培养(分装前) 1-10代细胞 遗传物质 改变 原代细胞 培养 加 液 40—50代细胞(细胞株) 未 遗传物质 改变 无限传代（细胞系） 已 传代培养 胰蛋白 酶 　细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。 1、无菌、无毒的环境 保证细胞顺利的生长增殖 添加一定量的抗生素，定期更换培养液 添加：糖（葡萄糖）、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等。 （四）、动物细胞培养的条件 2、营养 3、温度和PH 培养室中控制,使之达到 36.5 ± 0.5℃, 7.2~7.4 培养箱中提供O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 4、气体环境： 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 细胞的 细胞 培养基特有成分 、植物激素 葡萄糖、 培养结果 植物体 培养目的 快速繁殖、培育无病毒植株 获得 全能性 增殖 蔗糖 动物血清 细胞株、细胞系 细胞,某些蛋白质 【典型例题】 某研究小组为测定某种药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养。下列叙述正确的是（ ） A. 制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理肝组织块 B. 培养液需含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等 C. 为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素 D. 甲、乙细胞在持续传代培养过程中，均会出现停止增殖的现象 C 点拨：甲（肿瘤细胞）失去接触抑制，而乙（正常肝细胞）具有接触抑制，因此甲、乙细胞在持续的培养过程中，乙会出现停止增殖的现象 （一）、动物细胞核移植的概念： 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体. 克隆动物：用核移植的方法得到的动物。 动物细胞核移植 （二）、分类： 胚胎细胞核移植： 体细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复 全能性容易 细胞分化程度高，恢复 全能性困难 克隆动物:用核移植方法得到的动物. 　　克隆（clone）是指通过无性生殖而产生的遗传上均一的生物群，即具有完全相同的遗传组成的一群细胞或者生物的个体。克隆在希腊语中是“小树枝叶”的意思，用以指无性增殖物。 去核卵细胞 供体 细胞 电刺激使 两细胞融合 重组细胞 重组胚胎 新个体 代孕母牛C 胚胎移植 卵细胞培养 无性生殖 （三）、体细胞的核移植过程 高产奶牛A 供体细胞培养 供卵奶牛B 【典型例题】 某研究小组为测定某种药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列叙述正确的是(　　) A.制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理肝组织块 B.恒温培养箱中的CO2浓度维持在5%左右，以促进细胞呼吸 C.为了保证细胞培养所需的无毒环境，需大量添加各种抗生素 D.本实验应设置对照实验，以检测药物对甲、乙细胞的毒性大小 D 点拨：在利用肝组织块制备肝细胞悬液时，常用胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，因为胃蛋白酶需要在强酸环境下才能起作用，但这样的环境不适于细胞生存 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核 病毒颗粒 细胞核