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专题三 植物的组织培养技术及DNA和蛋白质技术 解题探究 — 植物组织培养过程及应用 例1乙醇等“绿色能源”的开发备受关注。利用玉米秸秆等生产燃料酒精已成为人势所趋。 （1） M物组织培养可实现玉米等的大规模快速繁殖，图解如下，山外植体通过植物组织培养技术培冇成完整植物，这项 技术利用了 原理，通过组织培养技术进行植物繁冇，可以很好地保持亲木的优良性状，原因 是 。A、B分别代表 和 ,过程①、②分别表示 和 O （2）在玉米组织培养过程屮，冇关说法不正确的是 （ ） 培育出的玉米植株个体都是纯合子 A细胞全能性最高 从外植体到A的过程不需要光照 从外植体到完整植株，细胞分裂都是冇丝分裂 （3）具冇耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具冇这些特性的 突变菌，诱变及筛选过程如下： 步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。 步骤2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意 和 ,加琼脂后灭菌, 制成同体平板。 步骤3：将紫外线照射后的菌液稀释涂布平板。 步骤4：根据 筛选出突变菌。 （4厂上述步骤2、3和4的依据分别是 （5）突变菌往往带有一些特殊的基因。在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重耍。PCR扩增反应中加入引物和DNA聚 合酶的作用分别是什么？ 答案（1）植物细胞全能性子代遗传物质与亲代相同，不会像有性生殖一样出现性状分离愈伤组织胚状体脱分化 再分化 （2） A （3） 添加高浓度蔗糖（或徜萄糖）调低pH是否能在选样培养基上生长 （4） 提供窩糖和酸性坏境；获得单菌落；能生长代表该菌落具有耐高糖和耐酸的特性 （5） 引物的作用是为DNA聚合酶发挥作用提供位点；DNA聚合酶的作用是从引物3端开始催化DM单链的延伸。 蛋白质的提取和分离 例2红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主耍是由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带①或CO.，,我们可以 选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，來提取和分离血红蛋白，请回答卜列有关问题: TOC \o 1-5 \h \z （1） 血红蛋H提取和分离的程序可分为四步： 、 、 和 。 （2） 实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，収血回來，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。 加入柠檬酸钠的目的是 0 以上所述的过程即是样品处理，它包括 、 、收集血红蛋白溶液。 （3） 收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离。 透析的目的是 ‘ 透析的原理是 o （4） 然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，瑕后经SDS-聚|人j烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。 ①样品纯化的目的是 ②血红蛋白有什么特点？ . 这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义？ 答案（1）样品处理粗分离纯化纯度鉴定 （2） ①防止血液凝|占|②红细胞的洗涤 血红蛋口的释放 （3） ①去除相对分子质疑较小的杂质②透析袋能使小分子自山进出，而大分子则保留在袋内 （4） ①通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋口除去 ②血红蛋白呈现红色 在用凝胶色谱法分离时可以通过观察颜色來判断什么时期应该收集洗脱液;这使血红蛋白的分离过 程非常直观，人人简化了实验操作 课时训练 —f 1.如图所示，图I为植物组织培养流程图，图II为植物组织培养过程的部分示意图，请据图冋答: 外丘体（消毎）无菌条件①培养基培养一完整的小植株②上辽匕胚状体_根、芽等图I 外丘体 （消毎） 无菌条件① 培养基培养 一完整的小植株 ②上辽匕胚状体_根、芽等 图I （1） 植物组织培养依据的原理是 。 （2） 图［中外植体是指从植物 分离出來的。 （3） 图I中的②和图IIA中培养基上的培养物都是由无特定形态与功能的细胞组成，称为 （4） 图II中D培养物已经形成幼体。请根据植物组织培养过程对图II重新排序： 0 答案（1）植物细胞的全能性 （2）器官、组织、细胞.原生质体（3）愈伤组织（4） B-A-D-C 2?下图表示在生物体外获収DNA （或目的基因）的两种方式。 P（引物）模板DNA DNA聚合移4种脱氧核仔酸A |变性（加热至940DNA解養 B］冷却至55七，引物结合到互补DNA链牆復jk至72? II I DNjD|M?环，获得PCR产物 II IK II II DNA DNA DNA DNA 图一 im 丄 IImRNA 单链 DNA DNA 图二 图一表示经PCR技术扩增获収DNA的过程。PCR是多聚酶链式反应的缩写。PCR方法模仿体内DNA的复制过程，首先使DNA 变性（加热至94C）,两条链解开为单链；然后冷却（至55°C）使引物（D对复制时所需的约20个核昔酸的短链）与单 链相应的碱基互补序列结合；再在热稳定DNA聚