中药成分的含量测定课件.pptVIP

中药成分的含量测定;第一节 含量测定的目的与意义 ;第二节 含量测定样品的处理 ;第二节 含量测定样品的处理 ;第二节 含量测定样品的处理 ;第二节 含量测定样品的处理 ;第二节 含量测定样品的处理 ;第二节 含量测定样品的处理 ;⒉键合相硅胶： 十八烷基键合相硅胶（简称C18或ODS）是常用的固体萃取剂，其次有烷基、苯基、氰基键合相硅胶，可用来分开脂溶性和水溶性杂质或成分。也常用于萃取，纯化水基质体液中憎水性药物。该类LSE的一般操作程序为： 1)柱的活化。用2ml甲醇冲洗以润湿键合相和除去杂质，再用0.5毫升水洗去柱中的甲醇。 2)上样。 3)清洗。用2～5ml的水清洗以除去弱保留的亲水成分，如无机盐、氨基酸、亲水的蛋白质、糖以及中等保留成分的极性化合物、低肽等。 4)洗脱。用2～5ml甲醇或甲醇-水洗脱大分子的肽、甾体、较亲脂的药物等强保留的待测组分。 ;⒊大孔树脂：它可分为极性和非极性型 极性 丙烯酰胺聚合物; 非极性 苯乙烯和二乙烯苯的共聚物. 其吸附性质与烷基键合相硅胶相似，通过疏水作用对非极性水溶性成份有吸附力。例如在测定复方归芪剂中的黄芪甲苷时，用大孔树脂除去水溶性的多糖杂质，再用30%乙醇洗脱黄芪甲苷。大孔树脂的主要特点是表面积极大，传质速率较高和具有不同的极性及适于吸附较大分子。 树脂在使用前需要前处理：用甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂除去杂质，有时还需用酸、碱清洗。该填料用量常为1～2g，有时也用100～150mg来萃取血、尿中药物，操作程序类似ODS填料。 ;第二节 含量测定样品的处理 ;第二节 含量测定样品的处理 ;⒍离子交换树脂： 憎水基质的离子交换树脂兼有离子交换剂及大孔树脂的一些性质，所以对于在水中溶解度不大的药物、洗脱剂中需含一定量的有机溶剂。 离子交换树脂柱可用于除去样品中的离子，防止组分分解，更常用于萃取样品液中可离解化合物。;第二节 含量测定样品的处理 ;（五）消化法 对样品进行有机破坏，常用于中药制剂中重金属的检查。 常用的破坏方法有湿法消化和干法消化法。 ⒈湿法消化：根据所用试剂不同，下面介绍三种??见的消化方法。 （1）硝酸—高氯酸法 该法破坏能力强，反应较激烈，故进行破坏时，必须严密注意切勿将容器中的溶液蒸干，以免发生爆炸。本法适用于血，尿、组织等生物样品和含动植物药制剂的破坏，经破坏后所得无机金属离子均为高价态，本法对含氮杂环类有机物破坏不够完全。 （2）硝酸—硫酸法 该法适用于大多数有机物质的破坏，无机金属离子均氧化成高价态，与硫酸形成不溶性硫酸盐的金属离子的测定，不宜采有此法。 ;第二节 含量测定样品的处理 ;第二节 含量测定样品的处理 ;第三节 常用定量分析方法 ;第三节 常用定量分析方法;第三节 常用定量分析方法;第三节 常用定量分析方法;第三节 常用定量分析方法;第三节 常用定量分析方法;第三节 常用定量分析方法;第三节 常用定量分析方法;第三节 常用定量分析方法;第三节 常用定量分析方法;第三节 常用定量分析方法;2、薄层荧光扫描法 基本原理：F=2.3K’I。ECL或F=KC 光源：氙灯或汞灯。 灵敏度：最低可测到10-50pg。 适用范围：适合于本身具有荧光或经过适当处理后可产生荧光的物质的测定。 Kubelka-Munk理论不适用于薄层荧光扫描，无需进行曲线校直。用薄层荧光扫描进行定量分析时，用斑点荧光强度的积分值（色谱峰峰面积）与斑点中组分的含量代替上式中F与C 进行运算。;（二）薄层色谱的规范化操作 1、仪器与材料 ①薄层板；②涂布器；③点样器材；④展开箱（层析缸）⑤显色与检测仪器 2、操作方法 ①薄层板的制备；②点样；③展开；④检测；;第三节 常用定量分析方法;（1）工作曲线 ①检查所选择的散射参数SX值是否适宜。SX值适宜则工作曲线被校直为直线，否则，调整SX值再校正，直至在一定点样量范围内工作曲线成直线为止。 ②考察工作曲线是否过原点，以便确定采用一点法或二点法定量。 ③确定点样量的线性范围。既使采用曲线校直，也只是在一定点样量范围内工作曲线为直线，因此需确定点样量的上、下限。 为降低定量误差，最好调整点样量，使供试品与对照品的峰面积相接近。 为了克服薄层板间差异，外标法及内标法均应采用随行标准法，即标准溶液与供试品溶液交叉点在同一块薄层板上。 ;第三节 常用定量分析方法;第三节 常用定量分析方法;（4）统计检验 统计检验是检验两种方法、两台仪器或两个人测量的两组实验数据的精密度或准确度（偶然误差或系统误差）间