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专题二十一生物技术在其他方面的应用 考点分布 ?生物技术在其他方面的应用 ?植物组织培养 考纲内容 仁从生物材料中提取某些特定的成分 2 ?植物的组织培养 3?实验：DNA的粗提取与鉴定 命题趋势 或与生产生活实际相联系，或与实验结合进行考查。 生物技术在其他方面的应用 一?DNA的粗提取与鉴定 4 ?基本原理、方法与目的 基本原理 方法 目的 DNA在不同浓度 液中的溶解度 0.14mol/L 的 Na 溶解度最低 卑 的NaCI溶 不同，在 CI溶液中的 \J 溶于高浓度 NaCI溶液中 然后稀释，使 DNA析出 a.NaCI溶液浓度为2mol/L时，DNA溶解，而 部分蛋白质发生盐析生成沉淀，通过过滤可除 去部分蛋白质及不溶于NaCI溶液的杂质 b?当NaCI溶液稀释至0.14mol/L时DNA析出， 过滤可除去溶于NaCI中的部分蛋白质和其他 杂质 0.14 NaCI 浓度(mol/L) DNA不被蛋白酶所水解 加入嫩肉粉 嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶，可以水解蛋白质 DNA不溶于酒精溶液 加入冷却酒 精95% DNA析出，除去溶于酒精的蛋白质 DNA可被二苯胺染成蓝色 加入二苯胺， 并沸水浴 鉴定DNA 2?实验步骤 提取血细胞核物质（蒸馆水涨破）——溶解（2mol/L NaCI溶液）——过滤（除杂质）——析 出（加蒸馆水，降NaCI浓度至0.14mol/L ） ——过滤——进一步提纯（体积分数为95%的冷 却酒精）——鉴定 二、植物芳香油的提取方法 方法 原理 步骤 适用范围 优点 不足 水蒸气 蒸馆法 利用水蒸气将挥 发性较强的芳香 油携带出来 水蒸气蒸憎? 分离油层■除 水过滤 提取玫瑰 油、薄荷油 等挥发性强 的芳香油 简单易行，便于 分离 会导致原料 焦糊和有效 成分水解 压榨法 通过机械加压，压 榨出果皮中的芳 香油 石灰水浸泡、 漂一压榨，过 滤、静置一再 次过滤 适用于柑 橘、柠檬等 易焦糊原料 的提取 成本低、保持原 料原有结构和 功能，常温下不 发生化学反应 分离较为困 难，出油率 相对较低  萃取法 使芳香油溶解在 有机溶剂中，通过 蒸发溶剂后可获 得 粉碎、干燥 萃取、过滤 浓缩 适用范围 广，原料的 颗粒细小， 充分浸泡在 有机溶剂中 出油率高，易于 分离 适用有机溶 剂不当会影 响芳香油的 质量 植物组织培养 —?植物组织培养技术 仁植物组织培养 （1）原理：细胞的全能性 （2）方式：愈伤组织培养（体培养基）和细胞悬浮培养（液体培养基）（3 ）过程：脱分化、再分化项目植物组织培养技术花药离体培养技术相同点理论依据 （2）方式：愈伤组织培养（ 体培养基）和细胞悬浮培养（液体培养基） （3 ）过程：脱分化、再分化 项目 植物组织培养技术 花药离体培养技术 相同点 理论依据 植物细胞的全能性 基本过程 恒物圖旨 纽毀购胞 匚 茎蠶邑圉€ 影响因素 选材、营养、激素、PH、温度、光照等 不同点 选材 体细胞 生殖细胞（精子） 生殖方式 无性生殖 有性生殖 2?植物组织培养技术和花药离体培养技术的异同 3?花粉植株（单倍休植株）产生的两种途径 花药中的花粉 胚状体分化丛芽 脱分化 尹分化 花药中的花粉 愈伤组织 丛芽 生根 两条途径取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。 4 ?植物激素与组织培养 用量比例不同，结果也不相同 生长素用量/ 生长素用量/细胞分裂素用量 高：利于根的分化、抑制芽的形成 /rr -Til -I- -±±-AA, / V /l JZh 4-iI XC A J TTZ ^4^ 影响植物组织培养的因素及成功的关键 仁影响 仁影响 (1 )内部因素：材料的选取 (2 )外部因素：营养成分的种类及配比；植物激素的用量及使用顺序；PH、温度、光照等； 无菌环境 2.获得成功的关键 (1 )植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗逆性差，对培养条件要求较高 培养材料一旦被微生物污染，就会导致实验失败。 无菌技术主要包括对操作空间、实验用具、实验材料以及操作者的消毒灭菌 注意：外植体消毒所用消毒剂是体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液，所 使用的清洗液是无菌水。