成纤维生长因子23抑制肾小管上皮细胞中血管紧张素转换酶2的表达.DOCVIP

成纤维生长因子23抑制肾小管上皮细胞中血管紧张素转换酶2的表达 薛 澄 周晨辰 付莉莉 张颖慧 顾向晨 王武涛 孙丽君 刘亚伟 梅长林 戴 兵 基金项目：国家自然科学基金81370844）和上海市浦江人才计划（12PJ1403300）资助项目 作者单位：200003 上海，长征医院肾内科 通信作者：戴兵，通信作者为daibin105@126.com 摘要 目的 观察成纤维生长因子（FGF）23对大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）中血管紧张素转化酶（ACE）2表达的影响。方法 FGF23刺激NRK-52E细胞24 h条件下分为0、10、25和100 ng/mL共4组，100 ng/mL FGF23刺激NRK-52E细胞条件下分0、6、12和24h共4组。采用免疫印迹和实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测ACE2 mRNA、蛋白的表达。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测NRK-52E细胞上清液中血管紧张素2（AngⅡ）的含量。免疫荧光法观察ACE2在细胞中的定位和表达强度。使用FGF受体抑制剂PD173074抑制FGF受体1。结果 FGF23 100组ACE2 mRNA和蛋白表达量均显著低于对照组（P均0.05）。随着FGF23刺激时间的延长，ACE2 mRNA、蛋白表达量逐渐减少，在24 h时间点均显著低于对照组（P值均0.05）。24 h时，200 ng/mL FGF23组中AngⅡ水平显著高于对照组（P0.05）。免疫荧光结果发现对照组中ACE2荧光强度最强，100 ng/mL FGF23刺激24 h组的ACE2荧光强度最弱。25 nmol/mL的PD173074与100 ng/mL FGF23共刺激NRK-52E细胞24 h后，FGF23组与对照组的差异无统计学意义（P0.05）。结论 高浓度的FGF23可以作用于FGFR1抑制肾小管上皮细胞中ACE2的表达。慢性肾衰竭中高FGF23可能通过抑制ACE2发挥潜在的肾脏毒性作用。 关键词 成纤维生长因子23；血管紧张素转化酶2；慢性肾衰竭 Fibroblast growth factor 23 inhibited the expression of angiotensin-converting enzyme 2 in renal tubular epithelial cells XUE Cheng, ZHOU Chenchen, FU Lili, ZHANG Yinghui, GU Xiangchen, WANG Wutao, SUN Lijun, LIU Yawei, MEI Changlin, DAI Bing. Department of Nephrology, Shanghai Changzheng Hospital, Shanghai 200003，China Corresponding author: Dai Bing，E-mail：daibin105@126.com Abstract Objective: To observe the influence of fibroblast growth factor 23 (FGF23) on the expression of the angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) in rat renal tubular epithelial cells (NRK-52E). Methods：NRK-52E cells were incubated with 0, 10, 25 and 100ng/mL of FGF23 （4 groups）at 24h. Then 100 ng/mL of FGF23 stimulated NRK-52E cells at 0, 6, 12 and 24h (4 groups). Angiotensin 2 (AngⅡ) in cell supernatant was detected by Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The expression of ACE2 was detected using real-time PCR and western blotting methods. Immunofluorescence was used to detect the localization and expression of ACE2. FGF receptor 1 was inhibited by FGF receptor inhibitor (PD173074). Results: Compared to the control group, FG