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重点高中生物选修3知识点总结(填空) PAGE PAGE 1 ———————————————————————————————— 作者： ———————————————————————————————— 日期： PAGE PAGE 6 选修3知识点复习试卷 专题1 ? 基因工程 （一）基因工程又叫 或 。 原理是 ，操作水平是分子水平。优点：打破物种界限； 地改造生物的遗传性状。 （二）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”—— （1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。 （2）功能：能识别DNA分子中特定 ，使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 （3）特点：具有 性。 （4）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 和 。 2.“分子缝合针”—— （1）两种DNA连接酶（ 和 ）：区别：前者只能连接黏性末端；而后者能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 （2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的脱氧核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”—— （1）载体具备的条件：①能够稳定保存并复制；②有一至多个限制酶酶切位点 ③含有标记基因，便于 。④对受体细胞无害。 （2）最常用的载体是质粒，化学本质是 。 （3）其它载体：λ噬菌体的衍生物、动植物病毒 （三）基因工程的基本操作程序 第一步：目的基因的获取 1.目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因。 2. 基因文库包括 和 。二者的区别： 文库类型 文库大小 基因中是否有启动子 基因中是否有内含子 基因多少 物种间基因交流 小 无 无 某种生物的部分基因 可以 大 有 有 某种生物的全部基因 部分基因可以 3.人工合成目的基因的两个条件：基因比较小；核苷酸序列已知。 4. 扩增目的基因 （1） 是多聚酶链式反应的缩写，原理DNA双链复制。 （2）过程：第一步变性：加热至90～95℃，DNA解链，不需要解旋酶；第二步复性：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链。变性和复性利用了DNA的热变性原理；第三步延伸：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。 第二步： 基因表达载体的组成：除了目的基因外，还必须有 等。 启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动 。标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞 出来。常用的标记基因是抗生素基因。 第三步：将目的基因导入受体细胞 1、将目的基因导入植物细胞：采用最多的是 法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。 2、将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 法。此方法的受体细胞多是 。 3、将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是 ，其转化方法是：先用 处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成 过程。 第四步：目的基因的检测和鉴定 1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 。 2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是 。 3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行 。 4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如：转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。 （四）基因工程的应用