番茄防御酶活性与番茄抗白粉病相关性研究.doc

PAGE PAGE 5 本科毕业论文 论文题目 番茄防御酶活性与番茄抗白粉病 相关性研究 学 院 草 业 学 院 专 业 植 物 保 护 毕业届别 姓 名 指导教师 职 称 大学教务处制 年六月 番茄防御酶活性与番茄抗白粉病相关性研究 摘要: 植物在病害或者环境胁迫条件下会产生酶促性的保卫性生化反应，酶活性测定表明：未接种番茄幼苗中,各品种PAL活性无明显变化，接种白粉菌后抗病品种和感病品种的PAL活性均有升高；未接种番茄幼苗中各品种间酶活性无明显变化，接种白粉菌后抗病品种的POD活性迅速升高，表现出对病菌侵染强烈的应激变化，而感病品种升高缓慢；未接种番茄幼苗叶片中,各品种间酶活性无显著差异，且都变化趋势不明显；接种白粉菌后抗病品种的PPO活性迅速升高，表现出对病菌侵染强烈的应激变化，而感病品种升高趋势相对缓慢。 关键词：番茄白粉病；番茄防御酶；抗病性；相关性 番茄制品是世界公认的健康食品，番茄中富含的番茄红素具有防癌抗癌、延缓衰老功效，并对因运动引发的哮喘等多种疾病有潜在疗效。2006年，中国出口番茄酱62.98万吨，出口金额达3.56亿美元，出口数量及金额分别增长了4.74%和18.83%，番茄已成为我国出口创汇的重要商品之一。 近年来，由于番茄的大面积种植，一些细菌性病害（斑点病、溃疡病、疮痂病、青枯病等）和一些真菌性病害（白粉病、叶霉病、灰霉病、早疫病、晚疫病）的发病和危害逐年加重。其中，番茄白粉病现在己经成为一种非常严重的世界性真菌病害，特别是在温室生产番茄中尤为严重。番茄白粉病严重影响了番茄的产量和质量，同时也是喷施杀菌剂最多的一种番茄病害，使得防治成本升高，环境污染严重。通常发生在番茄生长中后期，主要危害叶片，叶柄和茎等，发病严重时可造成绝产。病害在露地和保护地均可发生，但以保护地发病重，流行快，损失大。 植物在病害或者环境胁迫条件下会产生酶促性的保卫性生化反应，如光合作用先增强后减弱、呼吸作用增强、渗透性减弱甚至消失、形成绿岛然后褪色、形成过敏性坏死斑等。同时其代谢反应会发生变化，其中最明显的是由超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CTA)和过氧化物酶(POD)系统催化的保卫性反应的增强。另外，上述反应的代谢产物，如酚类物质和酮类物质的含量也同时会增加。伴随着呼吸作用的增强，一些与分解代谢和光呼吸有关的酶类的活性也会增强，这些酶主要有细胞色素氧化酶(AOA)，多酚氧化酶( PPO )。上述各酶都与植物抗病性生化反应有着重要的关系，因此研究保卫性反应酶类与抗病性的相关性有着重要的意义。 材料和方法 1.1材料 1.1.1 白粉菌来源 2008年5月份，采自甘肃省白银市水川镇井口村日光温室番茄白粉菌带回室内，接种健康感病番茄品种里格尔87-5植株上扩大繁殖，备用。 1.1.2 供试品种 根据2007年对64个加工番茄品种对白粉病抗性的田间调查结果，挑选高抗品种钻石、TOM0629D，耐病品种Z00-73、3379，感病品种里格尔87-5和高感品种3144等6个品种，种子均由甘肃省高台中化番茄制品公司提供。 1.2 方法 1.2.1 番茄幼苗的培养和接种方法 选用无病种子，种植在装有灭菌土的塑料营养钵中，每品种种50钵，每钵6粒。放在温室或培养室培养，于4~6叶期将发病叶片上的分生孢子扫落或抖落到健康植株叶片上，并保湿48h，每品种接种35钵（其中15钵用于测定酶活性，20钵用于调查统计发病率和病情指数），15钵喷清水作对照，并隔离培养。分别在接种前、接种后0.5d、1d、2d、4d、7d和10d检测各品种处理和对照的酶活性，并于病害特征明显后（高感品种发病率达到50%时），调查统计各品种发病率和病情指数。 1.2.2酶液提取及活性测定 1.2.2.1 实验所需化学试剂：0. 05mol/l磷酸缓冲液(PH为5.5)； 0.05mo1/1愈创木酚溶液;2%的双氧水溶液；0. lmol/1的儿茶酚溶液；20%三氯乙酸溶液。实验仪器用：精密数显恒温水浴锅；精密酸度计；分光光度计。 实验步骤:（1）粗酶液的制备，煎取5g叶片，剪碎后放入早置于冰浴中预冷过的研钵中，加入适量的磷酸缓冲液后研磨成匀浆，将匀浆完全转入离心管中后在3000r/min转速下离心l0min，上清液