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吸附柱色谱法操作步骤(CC) 复习旧课 色谱法按操作形式可以分为哪几类? 导入新课 吸附柱色谱法(CC) 课后习题 1、干法与湿法装柱有何操作要点。 2、柱色谱的洗脱溶剂应如何选择。 课后预习 * * 《中药化学实用技术》 教学目标: 1、学会吸附柱色谱的操作方法及要点。 2、知道吸附柱色谱的原理。 3、了解柱色谱的英文(CC)缩写。 教学重点: 吸附柱色谱法的操作及要点,收集液的鉴别方法。 教学难点: 系统溶剂的选择。 薄层色谱法、纸色谱法、柱色谱法 Rd,17500元 /g 约300元 /g 龙舟比赛 ? 先后 ? 分离 龙舟 水 阻力 人 推力 化学成分 固定相 吸附力 流动相 解吸附力 一、原理 固定相 流动相 化学成分 吸附力 解析附力 : 三要素 装柱 上样 二、操作过程 洗脱 收集 1、装柱 选柱 适量 硅胶 装柱 直径0.5-10cm,长度为直径的10-40倍 样品:硅胶1:20-1:50 均匀、检查 干法 分组操作 1、装柱 选柱 硅胶+初始洗脱剂 装柱 直径0.5-10cm,长度为直径的10-40倍 混悬液 湿法 装均匀 比较 2、上样 硅胶 样品液 混匀、阴干 上样 溶剂易溶 样品:硅胶1:1-1:2 干法装柱方式,均匀 干法 样品 溶剂 溶解 上样 溶剂易溶 滴加 湿法 2、上样 比较 3、洗脱 洗脱溶剂选择 洗脱 TLC筛选,Rf为 0.2 - 0.3为标准 洗脱速度,1-5滴/秒 第一组 10:1、9:1 第二组 8:1、7:1 第三组 6:1、5:1 第四组 4:1、3:1 4、收集 色谱段收集—有色化合物 等份收集—大多数化合物 目的:合并收集液 方式:薄层色谱鉴别 三、鉴别 显色一致 化学 成分 操作 过程 原理 鉴别 围绕一个点 柱色谱 操作 课后小结
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