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1. 植物组织培养与植物体细胞杂交 2. 动物细胞培养与细胞核移植 3. 动物细胞融合与单克隆抗体的制备 复习目标 一、植物组织培养与植物体细胞杂交 1.植物的组织培养 (1)原理:植物细胞的全能性 (2)操作流程: (3)培养条件:营养物质(水、无机盐、蔗糖、氨基酸和有机酸等)、激素(如细胞分裂素、生长素等)及其他条件(无菌、适宜的温度和pH等) 2.植物体细胞杂交 (1)植物细胞工程的应用 植物繁殖的新途径: 微型繁殖 作物脱毒 人工种子 培育作物新品种 细胞产物的工厂化生产 细胞产物的工厂化生产 2.植物组织培养和植物体细胞杂交的比较 名称 植物组织培养 植物体细胞杂交 原理 细胞的全能性 细胞膜具有一定的流动性和细胞的全能性 选材 选取根尖、茎尖、形成层部位最容易诱导脱分化 不同植物细胞融合后形成的杂种细胞 技术操作 脱分化、再分化等[来源:学科网ZXXK] 除脱分化、再分化外,还要用酶解法去除细胞壁,用一定的方法诱导细胞融合 关系 植物组织培养是植物体细胞杂交的基础,植物体细胞杂交所用的技术更复杂 【误区警示】植物组织培养中的易错点 (1)不同细胞体现全能性能力的大小不同,具体表现为:受精卵生殖细胞体细胞,离体细胞的全能性表达与分化程度呈负相关,但生殖细胞特殊。 (2)脱分化形成愈伤组织的过程不需要光,再分化过程需要光,因为愈伤组织利用有机营养成分,而试管苗需要进行光合作用以自养。 (3)植物组织培养中不同培养阶段培养基含有的激素比例不同,因为培养的目的不同(生根或生芽)。 (4)植物组织培养中用到的有机碳源一般为蔗糖,用葡萄糖也可以,但后者的成本高。 【典型例题】 白菜—甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种,它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。如图是“白菜—甘蓝”的杂交过程示意图。以下说法正确的是( ) A.除去细胞壁形成原生质体,可运用的酶是纤维素酶、淀粉酶和果胶酶 B.通常可诱导上述原生质体相互融合的方法是PEG和灭活的病毒诱导 C.杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁 D.愈伤组织形成“白菜—甘蓝”植物体必须经过脱分化和再分化两个过程 C 二、动物细胞培养与细胞核移植 1.动物细胞培养 2.动物体细胞核移植技术和克隆动物 (1)动物体细胞核移植技术的过程 (2)原理:动物体细胞核具有全能性。 (3)结果:产生新个体。 (4)应用:①加速家畜遗传改良进程,促进优良畜群繁育;②保护濒危物种;③生产医用蛋白;④作为异种移植的供体;⑤用于组织器官的移植。 【方法点拨】(1)动物细胞培养中两次用到胰蛋白酶,第一次用胰蛋白酶处理剪碎的组织使之分散成单个细胞,第二次使贴壁细胞从瓶壁上脱落下来。 (2)核移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本不同的原因:①克隆动物细胞质基因来源于另一个亲本,所以与植物组织培养不同(只来自于一个亲本),即克隆动物遗传物质来自两个亲本 ;②在发育过程中可能发生基因突变、染色体变异导致性状改变;③外界环境条件的影响引起不可遗传的变异。 某实验室做了如图所示的实验研究,下列与实验相关的叙述正确的是( ) 【典型例题】 A.过程①导入的诱导基因使成纤维母细胞发生基因突变 B.丙细胞既能持续分裂,又能分泌单一的抗体 C.过程②属于动物细胞培养过程中的原代培养 D.过程③④所用的培养基中都含有聚乙二醇 B 三、动物细胞融合与单克隆抗体的制备 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性 、细胞的增殖 融合前处理 先除去细胞壁 先使细胞分散开 使用的酶 纤维素酶和果胶酶 胰蛋白酶 比较项目 植物体细胞杂 交 动物细胞融合 诱导手段 物理法:离心、电激、振动 化学法:聚乙二醇等试剂诱导 除物理法和化学法,也可用灭活的病毒诱导 结果 杂种植株 杂交细胞 应用 培育植物新品种 主要用于制备单克隆抗体 意义 突破远缘杂交不亲和的障碍,打破了生殖隔离,扩展了杂交的亲本组合 单克隆抗体的制备
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