BRCA基因的克隆流 表达与纯化.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 厦门大学 硕士学位论文 BRCA基因的克隆，表达与纯化 姓名：李振 申请学位级别：硕士 专业：发育生物学 指导教师：李晓彤 2011 摘要摘要 摘要 摘要 乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，全世界每年确诊患有乳腺癌疾病的妇女 就高达100多万人。乳腺癌根据遗传与否，可分为散发性乳腺癌和家族遗传性乳 腺癌。通过对大量乳腺癌病例进行研究分析，发现遗传性乳腺癌患者占乳腺癌患 者的5％-10％。对高危遗传性乳腺癌家庭的进一步深入研究，发现了两种乳腺癌 易感基因BRCAl和BRCA2。虽然现在普遍认为BRCAI和BRCA2属于抑癌基 因，与同源重组、DNA损伤修复和转录调控等有关，但其具体作用机制仍不是 很清楚，有待进一步研究。 一 众所周知，特异性良好的抗体是研究蛋白质表达水平与功能的基础。为了得 到对BRCA基因进行更深一步研究所需的抗体，我们进行了如下基础工作，首 先分别克隆了BRCAI基因和BRCA2基因的一个片段，构建其原核表达载体， 后将构建好的原核表达载体转化大肠杆菌并诱导表达，获得了融合蛋白，并对融 合蛋白进行亲和纯化。将纯化后的融合蛋白作为抗原免疫BALB／c小鼠。免疫完 成后应用ELISA方法检测抗血清效价。随后又构建了真核表达载体转染293T细 胞，利用我们所获得的鼠抗血清检测转染293T细胞后的