ERα36在PC12细胞血清吸营养剥夺耐受性中的作用初探.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 辽宁师范大学硕士学位论文摘 辽宁师范大学硕士学位论文 摘 要 研究表明，雌激素参与缺血性脑卒中的神经保护作用。雌激素主要与雌激素受体结 合，通过基因组模式或非基因组模式发挥生物学效应。新近发现的ER—a36是ER一0【一个 亚型，它广泛表达在乳腺、卵巢、肝、骨等细胞和组织中，并可介导膜起始的雌激素信 号通路。本室前期研究发现，ER—a36也广泛表达在脑内多个区域，但作用尚不明确。 本实验利用RNA干扰技术建立的ER—a36基因敲低细胞系，通过免疫细胞化学、免 疫细胞荧光、MTT、Hoechst染色、荧光素酶分析、Western blot等方法，探讨了ER—ct36 在PCI2细胞血清营养剥夺耐受性中的作用，为临床预防和治疗缺血性脑卒中提供实验 依据。 结果： 1．原代培养不同时问的皮层和海马神经元中均有ER—cG6表达，且主要分布在胞浆 和胞膜上，并与Caveolin．1共定位。原代培养的皮层神经元和海马神经元纯度较高，NSE 免疫阳性率均达到97％。 2．PCI2细胞对血清营养剥夺的耐受具：百明显的时间和血清浓度依赖性。细胞在含 2．5％血清的无酚红培养基中生长速度减慢，其存活率与正常培养PCI2细胞相比显著降 低，以此可建立血清营养剥夺细胞模型；此外，细胞在血清剥夺(o．5％血清)2 h时， 不会发生凋亡。 3．敲低ER—ct36，降低了细胞