EstA CbpA对H跑TP1细胞ICAM1表达影响研究及肺炎链球菌快速诊断.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 ．里型堕堂堕堡主兰垡鲨茎 ．里型堕堂堕堡主兰垡鲨茎 ．一—— 。———————————————————————————————————一一。 中文摘要 EstA、CbpA对THP一1细胞It／Ill-1表达的影响研究及肺炎链 球菌快速诊断 目的： 建立pET28(a+)一EstA、pET28(a+)一CbpA表达载体，表达纯化EstA、CbpA 重组蛋白；研究EstA、CbpA重组蛋白对THP一1细胞ICAM一1表达的影响；建立 cpsA和spn9802两种引物基因定量检测肺炎链球菌检测方法。 方法： 1 分别将含酶切位点的眙删、CbpA扩增产物与含相同酶切位点的pMDl8T双酶 切后进行连接，建立重组载体pMDl8T-EstA、pMDl8T-CbpA。将重组载体转 入JMl09。含DMDl8T-EstA、pMDl8T—CbpA的JMl09摇过夜后提取质粒，经 酶切鉴定后将pET28(a+)表达载体经与瓜棚、CbpA扩增产物相同的酶酶 切，将酶切后的pMDl8T—EstA、pMDl8T—CbpA分别与pET28(a十)相连，构 建重组质粒pET28(a+)一EstA、pET28(a+)一CbpA。重组质粒经相应的酶 酶切鉴定后转化至BL21。根据不同的温度和不同的IPTG浓度分别对含pET28 (a+)一EstA、pET28(a+)一CbpA的