尿中δ—氨基—γ—酮戊酸δ—ALA的测定.pptVIP

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2019-09-21 发布于湖北
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尿中δ—氨基—γ—酮戊酸δ—ALA的测定.ppt

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* * [临床意义 ] 铅吸收或铅中毒时，尿中δ-氨基-γ-酮戊酸（δ-ALA）的含量增高，故测定尿中δ-ALA的含量，有助于了解铅吸收和铅中毒的诊断。特异性，灵敏性均较差 ——乙酸乙酯萃取—对二氨基苯甲醛基比色法尿中δ-ALA + 乙酰乙酸乙酯吡咯化合物（经乙酸乙酯提取）+显色剂（对二甲氨基苯甲醛) →红色化合物 100℃ PH=4.6 分光光度计；水浴锅，电炉；离心机(1500-2000r/min)；具塞比色管10m1 20支；移液管2m1 1支；吸管10m1 4支、5m1 1支、2m1 2支；离心管10m1 10支。乙酰乙酸乙酯；乙酸乙酯；醋酸盐缓冲液；对—二甲氨基苯甲醛显色剂； ALA标准溶液；标准色列制备与标准曲线绘制尿样测定：测定前须用比重计测定尿比重乙酸乙酯参比分光光度计，波长554nm ，零管参比提出液2ml于另具赛比色管中，加2ml显色剂，加塞振摇，静置10分钟离心5分钟加塞振摇1分钟，静置分层 4.0 乙酸乙酯（ml）混匀，沸水中加热10分钟，冷却至室温乙酸缓冲液0.4 0.4 乙酰乙酸乙酯（ml） 2.0 乙酸缓冲液（ml） 1.0 1.0 1.0 1.3 1.5 1.7 1.9 2.0 蒸馏水（ml）尿样1.0 尿样1.0 1.0 0.7 0.5 0.3 0.1 0.0 ALA标液（ml）空白管样品管 5 4 3 2 1 0 管号试剂 1．标准曲线的绘制 2．样品管吸光度减去尿样空白管吸光度，查标准曲线得样品管中ALA含量(μg) 3．计算公式：（1）尿样比重在正常范围（1.010-1.035）内尿中 ALA(mg／L)=样品管中 ALA含量(μg) （2）尿样比重不在正常范围内尿中ALA(mmo1／L)= × ×0.0076 样品管含量（μg ） 1（尿样） 1.020-1.000 尿比重-1.000 *