聚合物在生物高分子分离中的应用.PPTVIP

如何控制电渗流？ 理论： 能影响电渗的因素都有可能用于电渗的控制 实际： 能理想地调节电渗而又不影响分离过程的控制方法目前 不多见． 对于DNA分离及测序来说，pH-8.3，常用管壁涂层（涂覆) 技术. 化学涂覆 物理涂覆 用于DNA分离的聚合物 均聚物 共聚物 a. 无规共聚物 C. 接枝共聚物 PAM-g-PNIPAM （聚丙烯酰胺-g- 聚N-异丙基丙烯酰胺) PNIPAM-g-PEO (聚N-异丙基丙烯酰胺-g- 聚环氧乙烷) PAM-g-PDMA （聚丙烯酰胺 -g- 聚N，N- 二甲基丙烯酰胺） PDMA-g-PMMA（聚N，N- 二甲基丙烯酰胺-g-聚甲基丙烯酸甲酯）等 存在的问题： 共混聚合物 不同分子量的PEO分离ds 和ss DNA HEC，LPA等不同分子量的混合物也都能成功地对DNA分离或排序 存在的问题： 准互穿网络聚合物 * * 电渗是CE的基本现象之一，它可以控制组分的迁移速度和方向，进 而影响CE的分离效率和重现性． 如聚丙烯酰胺、聚乙烯基吡咯烷酮涂层可在pH9-pH6以内基本消除电渗 优点 抑制熔硅毛细管表面Si－OH解离，修饰表面Zeta电势． 聚合物或硅烷化试剂的取代基覆盖已离解的Si－OH． 增加了内壁表面层附近溶液的粘度，涂层的厚度和密度都将影响到表面　　　层附近溶液的粘度，从而影响涂层的涂覆效果。 涂层寿命长，稳定性好，分离效率高。 缺点 化学键合的过程中涉及毛细管硅烷化和引发单体聚合两步反应，一方面受两步反应的转化率影响，Si－OH很难被完全屏蔽；另一方面，毛细管内的聚合反应很难控制，容易造成涂层的不均一性、不规整性，甚至阻塞毛细管。 价格昂贵。 涂层制备过程简单易操作，涂覆过程可一步完成， 涂层可再生。这种涂层可以是中性的、带正电荷的、也可以是吸附在带正电的聚合物涂层表面转而带负电荷的。 优点 缺点 物理吸附涂层稳定性不及化学键合涂层． 交联聚合物: 交联聚丙烯酰胺、琼脂糖 非交联聚合物 　　　　　　　　　　　poly-N-hydroxyethylacrylamide（PHEA) 存在的问题： 理想的筛分介质：高筛分能力、低粘度、自涂覆功能 poly (DEA-co-DMA)　 聚 (N, N -二乙基丙烯酰胺- co -N, N - 二甲基丙烯酰胺） poly (AM-co-DMA)　 聚(丙烯酰胺- co - N, N - 二甲基丙烯酰胺) poly (AA-co-AG)　　 聚(丙烯酰胺- co - β-吡喃型葡萄糖) poly(AM-co-AAG)　　 聚(丙烯酰胺- co -葡糖酰丙胺) poly(NEEA-co-NMEA)　聚(乙氧基乙基丙烯酰胺- co -乙氧基甲基丙烯酰胺)等 b.嵌段共聚物 PEG-(CnF2n+1)2 末端带有碳氟化合物的聚乙二醇 PEO-PPO-PEO 低分子量的聚环氧乙烷和聚环氧丙烷的三嵌段共聚物 BEB/EBE 聚环氧乙烷和聚环氧丁烷的三嵌段共聚物等 Yanmei Wang,Dehai Liang, Jingcheng Hao, Dufei Fang, Benjamin Chu, Electrophoresis 2002, 23, 1460-1466 Mechanism of particle formation by inverse microemulsion polymerization of AM/AIBN system. M is monomer acrylamide; I is initiator; R is free radical. Electrophoretic separation of DNA fragments generated on Big Dye TM Terminator Cycle Sequencing Standard with AmpliTaq FS under optimum experimental conditions: 2.5% IPNs, 200 V/cm and room temperature. A-track red, T-track blue, G-track green, and C-track black. Electrophoretic conditions were as follows: effective length 36 cm, total length 41cm, 75-?m-i.d., 365-?m-o.d. anode buffer 1?TTE; cathode buffer 1?TTE/7M urea. The samp