【全程方略】高中生物 专题2课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数精讲导学名师优质课件 新人教版选修1.pptVIP

(2)在实验前应该对计数板、吸管等器具进行_______处理。 (3)如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应采取的措施是____________________________________________。 (4)如果观察到如图所示a、b、c、d、e 5个大格共80个小室内共有酵母菌48个，则上述1 mL酵母菌样品中约有酵母菌_____ 个；要获得较为准确的数值，减少误差，你认为该怎么做? __________________________________________________。 【解题关键】解答本题时，需要掌握用计数板对酵母菌细胞进行计数的方法，理解图中每个方格所代表的含义，还要注意若酵母菌密度过大，应适当稀释后再计数。 【解析】(1)在从试管中吸取酵母菌之前，应将试管轻轻振荡几次，目的是使酵母菌在培养液中分布均匀。酵母菌的培养液应置于适宜条件下，并且每隔24小时就要统计一次菌落数目。 (2)为了避免杂菌污染，实验中所用吸管、计数板等器具需进行灭菌处理。 (3)(4)解答时要注意以下两点：①统一单位；②注意体积的变化。400个小室共容纳液体总体积为0.1 mm3，则80个小格容纳体积为2×10-2mm3，含酵母菌48个，又因酵母菌培养液总体积为100 mL，统一单位后即可求出酵母菌个数。 答案：(1)Ⅰ.应将试管轻轻振荡几次再吸取酵母菌培养液进行计数 Ⅱ.应将酵母菌培养液放置在适宜温度下培养 Ⅲ.应连续七天，每天观察、取样计数并记录数据 (2)灭菌 (3)适当稀释 (4)2.4×108 多次计数，求平均值 【互动探究】 (1)上题中对计数板、吸管等器具进行灭菌的方法是什么？ 提示：干热灭菌。 (2)统计菌落数目除了上题中的方法外还有哪些方法？ 提示：活菌计数法、滤膜法。 课题2 土壤中分解尿素的细菌 的分离与计数 一、筛选菌株的思路 1.自然界中目的菌株的筛选： (1)依据：根据它对_________的要求，到相应的环境中去寻找。 (2)实例：PCR技术过程中用到的耐高温的______________，就 是从热泉中筛选出来的Taq细菌中分离出来的。 生存环境 Taq DNA聚合酶 2.实验室中目的菌株的筛选: (1)原理：人为提供有利于_________生长的条件(包括营养、 温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。 (2)方法：利用___________分离。 ①选择培养基：在微生物学中，将允许_____种类的微生物生 长，同时_____或_____其他种类微生物生长的培养基，称为选 择培养基。 ②选择分解尿素的细菌的培养基特点：_____是唯一氮源，按 物理性质归类为___________。 目的菌株 选择培养基 特定 抑制 阻止 尿素 固体培养基 二、统计菌落数目的方法和注意事项 1.常用方法：稀释涂布平板法。 (1)统计依据： ①当样品的_______足够高时，培养基表面生长的一个菌落， 来源于样品稀释液中的一个_____。 ②通过统计平板上的_______来推测样品中大约含有的活菌数。 稀释度 活菌 菌落数 (2)计算公式：每克样品中的菌株数=__________。 C：代表某一稀释度下平板上生长的___________。 V：代表涂布平板时所用的稀释液的_____。 M：代表_________。 (3)注意事项： ①一般选择菌落数在________的平板进行计数。 ②统计的菌落数往往比活菌的实际数目___。 ③统计结果一般用_______而不是用_______来表示。 ④设置对照：主要目的是排除实验组中___________对实验结 果的影响，提高实验结果的可信度。 (C÷V)×M 平均菌落数 体积 稀释倍数 30～300 低 菌落数 活菌数 非测试因素 2.其他方法 利用_______直接计数 滤膜法 显微镜 三、实验设计 1.土壤取样： (1)取样原因：土壤有“___________________”之称。同其他 生物环境相比，土壤中的微生物，数量_____，种类_____。 (2)土壤要求：富含_______，pH接近_____且潮湿。 (3)取样部位：距地表约___________的土壤层。 微生物的天然培养基 最大 最多 有机质 3 cm～8 cm 中性 2.样品稀释： (1)稀释原因：样品的_________直接影响平板上生长的_____ _____。 (2)稀释标准：选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证获 得菌落数在________之间，便于计数。 (3)稀释倍数： ①测定土壤中细菌的数量，一般选用104、105和106倍的稀释液 进行平板培养。 ②测定放线菌的数量，一般选用_____________倍稀释。 ③测定真菌的数量，一般选用_________