人类CD8记忆T细胞体外扩增方法的研究-北京大学学报.pdf

中国病理生理杂志　ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＰａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　２０１３，２９（７）：１３３９１３４４ ·１３３９· ［文章编号］　１０００４７１８（２０１３）０７１３３９０６ ·实验技术 · ＋  人类ＣＤ８ 记忆Ｔ细胞体外扩增方法的研究 罗海华，　周　南，　张　旭，　郭学敏，　张　辉，　刘　超△ （中山大学人类病毒学研究所，热带病防治研究教育部重点实验室，广东 广州５１００８０） ＋ 　　［摘　要］　目的：研究体外扩增人类ＣＤ８记忆Ｔ细胞的新方法，为抗病毒与抗肿瘤的过继性免疫治疗提供 新的手段。方法：将ａｎｔｉＣＤ３抗体、ａｎｔｉＣＤ２８抗体、ＣＤ７０、白细胞介素（ＩＬ）２、ＩＬ７和ＩＬ１５进行排列组合，设计出 ＋ ６３种刺激方式，对体外分离得到的正常人外周血ＣＤ８ Ｔ细胞进行体外扩增；培养 １４ｄ后进行细胞计数，并检测 ＋ ＋ ＋ ＣＤ８ Ｔ细胞的纯度以及ＣＤ８中枢记忆Ｔ细胞（ＴＣＭ）和ＣＤ８效应记忆Ｔ细胞（ＴＥＭ）所占的比例，进而计算出 ＋ ＋ ＋ ＋ ＣＤ８ Ｔ细胞、ＣＤ８ ＴＣＭ和ＣＤ８ ＴＥＭ的体外扩增倍数，从而确定理想的刺激方法。结果：体外扩增 ＣＤ８ Ｔ细 ＋ ＋ 胞、ＣＤ８ ＴＣＭ和ＣＤ８ ＴＥＭ的理想刺激方式均为ａｎｔｉＣＤ３抗体、ＩＬ２和ＩＬ７三者的组合；该刺激方式使３种细胞 在培养１４ｄ后分别扩增了１３．１９、１３．２８和１５．２７倍。结论：ＡｎｔｉＣＤ３抗体、ＩＬ２和ＩＬ７三者的组合，是刺激人类 ＋ ＣＤ８记忆Ｔ细胞体外扩增的相对理想方法。 ＋ ［关键词］　过继性免疫治疗；ＣＤ８记忆Ｔ细胞；体外扩增 　　［中图分类号］　Ｒ３２９．２１　　　　　［文献标志码］　Ａ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００４７１８．２０１３．０７．０３４ ＋ ＭｅｔｈｏｄｓｆｏｒｅｘｐａｎｓｉｏｎｏｆｈｕｍａｎＣＤ８ ｍｅｍｏｒｙＴｃｅｌｌｓｉｎｖｉｔｒｏ ＬＵＯＨａｉｈｕａ，ＺＨＯＵＮａｎ，ＺＨＡＮＧＸｕ，ＧＵＯＸｕｅｍｉｎ，ＺＨＡＮＧＨｕｉ，ＬＩＵＣｈａｏ （ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＨｕｍａｎＶｉｒｏｌｏｇｙ，ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＴｒｏｐｉｃａｌＤｉｓｅａｓｅＣｏｎｔｒｏｌｏｆＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，ＳｕｎＹａｔｓｅｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１００８０，Ｃｈｉｎａ．Ｅｍａｉｌ：ｃｈａｏｌｉｕｌｃ２０１３＠１２６．ｃｏｍ） ＋ 　　［ＡＢＳＴＲＡＣＴ］　ＡＩＭ：ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｎｅｗｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒｔｈｅｅｘｐａｎｓｉｏｎｏｆｈｕｍａｎＣＤ８ ｍｅｍｏｒｙＴｃｅｌｌｓｉｎｖｉｔｒｏａｎｄ ｐｒｏｖｉｄｅｎｏｖｅｌｍｅａｎｓｏｆａｎｔｉｖｉｒａｌａｎｄａｎｔｉｔｕｍｏｒａｄｏｐｔｉｖｅｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ．ＭＥＴＨＯＤＳ：Ｓｉｘｋｉｎｄｓｏｆｓｔｉｍｕｌｉ，ａｎｔｉＣＤ３ａ