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题 目:酵母辅酶Q生物合成甲基转移酶
的分离及SDS分析
姓 名: 丁娟娟
学 号: 200907020047
系 别: 生命科学系
专 业: 生物工程
年级班级: 2009级生物工程
指导教师: 陈良兵
201
毕业论文(设计)作者声明
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论文题目:酵母辅酶Q生物合成甲基转移酶的分离及SDS分析
作者单位:生命科学系
作者签名: (学号:200907020047)
年? ? 月? ? 日
目 录
TOC \o 1-3 \h \z \u
摘 要 1
引言 1
1. 材料与方法 2
1.1 实验所用的材料和仪器 2
1.1.1 实验材料 2
1.1.2 实验仪器和药品及试剂 2
1.1.3 培养基配制 3
1.2 实验方法 3
1.2.1 米酒中酵母的富集 3
1.2.2 酵母增殖液中酵母的分离纯化 4
1.2.3 酵母的扩大培养及生长曲线的测定 4
1.2.4 酵母细胞的破碎 4
1.2.5 甲基转移酶的初步分离 4
1.2.6 甲基转移酶的SDS分析 5
2. 结果与分析 5
2.1 酵母菌分离结果 5
2.2 酵母菌显微镜检测结果 6
2.3 酵母菌纯化结果 6
2.4 酵母菌生长曲线 7
2.5 结果分析 8
3. 结论 8
参考文献 9
致 谢 11
酵母辅酶Q生物合成甲基转移酶的分离
及SDS分析
摘 要:本文以米酒为材料,从中筛选出酿酒酵母,将其作为菌种。通过分光光度法测定酵母的生长曲线。收集对数期酵母细胞并将菌体细胞通过超声波破碎,然后离心分离得到粗酶液,采用凝胶层析的方法对粗酶液进行分离,将分离出的各管粗酶液进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,根据甲基转移酶的分子量范围,通过对甲基转移酶所在管粗酶液电泳从而将甲基转移酶初步分离纯化。
关键词:酵母;辅酶Q生物合成甲基转移酶;离心分离;聚丙烯酰胺凝胶电泳
The Primary Purification and SDSAnalysis of Coenzyme-Q Biosynthesis Methyltransferase Enzyme in Saccharomyces Cerevisiae
Abstract: In this study, Saccharomyces cerevisiae was screened from rice wine. The growth cruve of yeast was determined using spectrophotometry. The cells of yeast were broken by ultrasonic, then the broken cells were centrifugaled and obatained the supernatant. The supernatant was separated through the chromatography and got the separated simples. Finaly, the separated simples were analysised using SDS. The results showed that the methyltransferase was primary purified.
Key words: Yeast; Coenzyme-Q biosynthesis methyltransferase; Centrifugation; SDS
引言
甲基转移酶是生物有机体内普遍存在的一种重要酶类,它能催化遗传物质DNA的甲基化,在基因表达及动物生长
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