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(5)在进行分离分解尿素的细菌的实验时,A同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只筛选出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有______。(填序号) ①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照 思维导图: 深度剖析 (1)培养基中加入尿素的目的是筛选尿素细菌。 (2)尿素可为尿素细菌提供氮源,震荡可为目的菌株提供氧气。 (3)在固体培养基中接种常用稀释涂布平板法和平板划线法。 (4)操作器械需灭菌,操作者双手需消毒。 (5)土样不同、培养基污染、操作失误均可能导致计数误差。 答案 (1)目的菌 选择 (2)尿素 葡萄糖 为目的菌提供氧气 (3)稀释涂布平板(平板划线) (4)①和② ③ (5)①②③ [思维拓展](1)利用选择培养基设计实验分离纯化微生物。 ①真菌:用含青霉素的培养基分离。 ②金黄色葡萄球菌:用含高浓度食盐水的培养基分离。 ③固氮微生物:用无氮培养基分离。 ④自养型微生物:用含无机碳源的培养基分离。 ⑤光合细菌:用含无机碳源的培养基在无氧而有光照的环境中分离。 ⑥厌氧型和兼性厌氧型微生物:用普通培养基在无氧条件下分离。 ⑦乳酸菌:用乳酸含量较高,pH较低的普通培养基分离。 ⑧假单胞杆菌:用石油作为唯一碳源的培养基分离。 (2)微生物分离与计数中两种对照组的作用: ①判断培养基中是否有杂菌污染,需将未接种的培养基同时进行培养。②判断选择培养基是否具有筛选作用,需设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养,观察两种培养基上的菌落数目,进行对比得出结论。 【例2】 下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述中,错误的是 (  )。 A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板 B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上 C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48h D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 微生物的计数 思维导图: 深度剖析 确定对照组无菌后,选择菌落数在30~300的平板进行计数,D错;A是培养基的灭菌方法,B设置了一系列对照实验,C是细菌的培养方法,A、B、C三个选项均是正确的。 答案 D 单击此处进入 随堂达标检测 旁栏思考题 1.想一想,如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数? 答案 统计某一稀释度下平板上的菌落数,最好能统计3个平板,计算出平板上的菌落数的平均值,然后按课本旁栏的公式进行计算。 2.为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度?测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围相同吗? 答案 这是因为土壤中各类微生物的数量(单位:株/kg)是不同的,例如在干旱土壤中的上层样本中,好氧及兼性厌氧细菌数约为2 185万,放线菌数约为477万,霉菌数约为23.1万。因此,为获得不同类型的微生物,就需要按不同的稀释度进行分离,同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围不相同。 练习(教材P26) 1.提示 菌落是单个微生物在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度,形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞的群落。可以通过稀释涂布平板法计算活菌的数目,其原理是培养基上的一个菌落来源于一个活菌。 2.提示 利用以尿素为唯一氮源的选择培养基在无氧环境中培养牛瘤胃提取物,选择能够正常生长的菌落即为分解尿素的微生物。 解析 反刍动物的瘤胃中含有大量的微生物,其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌,接触空气后会死亡,因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备选择培养基外,还应参照厌氧菌的培养方法进行实验设计。 热点考向示例 随堂达标检测 课堂互动探究 教科书问题解答 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 课程标准 测定某种微生物的数量。 课标解读 1.利用选择培养基分离细菌。 2.运用活菌计数法测定土壤中尿素细菌的数量。 1.筛选菌株 (1)自然界中目的菌株筛选的依据是根据它对 的要求,到相应的环境中去寻找。 (2)实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于 生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时 或 其他微生物生长。 微生物的分离与计数 生存环境 目的菌株 抑制 阻止 (3)选择培养基:在微生物学中,将允许 种类的微生物生长,同时 和 其他种类微生物生长的培养基,称作选择培养基。 2.统计菌落数目 (1)常用方法:

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