蒸发光检测器校准方法作业指导书.docVIP

PAGE PAGE 6 PAGE 1 编号：JL13-理化-作业-121 蒸发光检测器校准方法 作 业 指 导 书 编写： 年 月 日 审核： 年 月 日 批准： 年 月 日 理化实验室蒸发光检测器校准方法作业指导书 1 使用范围 本规范主要适用于新制造、使用中或修理后的蒸发光检测器的校准。 2 引用文献 《液相色谱仪 ELSD 蒸发光散射检测器简介与校准方法研究》 广东省计量院 JJG705-2002《液相色谱仪检定规程》 蒸发光检测器使用说明书 3 术语和计量单位 蒸发光散射检测器是上世纪90年代开始应用的一种新型通用性的HPLC质量检测器：其主要特点在对于没有紫外吸收的化合物，比如皂甙、内酯、糖类等化合物，在ELSD上会有响应,而且稳定性好,灵敏度高,可进行梯度洗脱分析。在我国中药、食品等检测领域有着广乏的应用。 4 概述 通常，蒸发光检测器的结构是由雾化器蒸发、漂移管和光散射池三部分组成。其工作原理如图所示，雾化器与分析柱出口直接相连，柱洗脱液进入雾化器针管在针的末端，脱洗液和充入的气体（通常为氮气）混合形成均匀的微小液滴，可通过调节气体和流动相的流速来调节雾化器产生的液滴的大小。漂移管的作用在于使气溶胶中的易挥发组分挥发，流动相中的不挥发成分经过漂移管进入光散射池。在光散射池中，光源照射雾状颗粒产生散射光，经光电倍增管收集，根据散射光强正比于溶质粒子数目和粒子大小，样品组分含量得到检测。本校准方法主要依据《液相色谱仪 ELSD 蒸发光散射检测器简介与校准方法研究》和JJG705-2002《液相色谱仪检定规程》，对蒸发光检测器的校准进行了规范。 5 计量性能要求 5.1外观 5.1.1 蒸发光检测器应有下列标志：仪器名称、型号、制造日期和仪器编号、制造厂名、国产离心机还应有制造计量器具许可证标志及编号。 5.1.2 仪器外观不应有影响仪器正常工作的机械损伤。 5.1.3 仪器的各紧固件和电缆接插件均应紧固，插接良好；各运动件运行平稳自如；各功能键应完好，工作正常。 5.1.4 仪器的指示刻度和数字清晰，数字显示完整； 5.2 仪器技术性能 5.2.1 输液系统：输液管路接口紧密牢固，在规定的压力范围内无泄漏。 5.2.2流量设定值误差SS 和流量稳定性误差SR 应符合表1 的要求 5.2.3 梯度误差GC：不超过±3 % 5.2.4柱温箱温度设定值误差ΔTC：不超过±2℃ 5.2.5温度稳定性TC：不超过1℃ 5.2.6 噪声：优于1mv；漂移：应优于0.5%/30min。 5.2.7 检出限：(100ng-100pg) 范围内（葡萄糖） 5.2.8 表1 流量设定误差SS 和流量稳定性误差SR的要求 流量设定值/（ml/min） 0.5 1.0 2.0 测量次数 3 3 3 流动相收集时间/min 10 5 5 允许误差 SS 5% 3% 2% SR 3% 2% 2% 注：1.最大流量的设定可根据用户使用情况而定。 2.对于特殊的、流量小的仪器，流量的设定可以根据用户使用情况选大、中、小三个流量，流动相的收集时间则根据情况适当缩减或延长。 6 计量器具控制 6.1校准的环境条件 6.1.1环境温度：（15～35）℃ 6.1.2相对湿度：≤80％，或按仪器说明书规定。 6.1.3电源：电压AC（220±10）V，频率（50±1）Hz。 6.1.4仪器周围应无强烈振动、无强烈交流电干扰，无强气流及酸、碱等腐蚀性气体。 6.1.5仪器及电源应有良好接地。 6.2所需标准器及标准物质 6.2.1 6.2.2 6.2.3 6.3 校准条件 采用C18柱，流动相为90%的水和10%的甲醇，采用等度洗脱方式，雾化载气为高纯氮气等。 7 校准项目和校准方法 7.1输液系统的检校 7.1.1泵耐压的检校 将仪器各部分连接好，以100%甲醇为流动相，流量为 1mL/min，按说明书启动仪器，压力平稳后保持10min，用滤纸检查各管路接口处应无湿迹。卸下色谱柱，堵住泵出口端（压力传感器以下），使压力达到最大允许值的90%，保持5min无泄漏。 7.1.2泵流量设定值误差SS、流量稳定性误差SR的检校 参照下表的要求设定流量，启动仪器，压力稳定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集下表规定时间流出的流动相，在分析天平上称重，按下式计算SS和SR。 式中：FM--，流量实测值，mL/min； W2--容量瓶+流动相的质量，g； W1