吸附实验初稿.docVIP

　 大孔吸附树脂是以苯乙烯和丙酸酯为单体,加入乙烯苯为交联剂,甲苯、二甲苯为致孔剂,它们相互交联聚合形成了多孔骨架结构。树脂一般为白色的球状颗粒,粒度为20～60 目,是一类含离子交换集团的交联聚合物,它的理化性质稳定,不溶于酸、碱及有机溶剂,不受无机盐类及强离子低分子化合物的影响。树脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子(吸附质) 之间的范德华引力,通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作,使有机化合物根据有吸附力及其分子量大小可以经一定溶剂洗脱分开而达到分离、纯化、除杂、浓缩等不同目的。 大孔吸附树脂对巴戟天多糖提取液脱色的静态吸附实验 曲线的制作和最大吸收波长的确定 脱色效果及最大吸收波长的确定 巴戟天多糖样品溶液（50mg/mL）的配制：准确称取巴戟天多糖粗品5.0111g，置于100mL容量瓶中，用纯净水溶解，超声助溶。待完全溶解后定容，摇匀备用。 湿法装柱：将大孔弱碱性丙烯酸系阴离子交换树脂D941用少量乙醇置于烧杯中浸泡，随后装入直径约1cm的层析柱（柱体积BV=30mL），再用80%~90%乙醇洗至流出液至无色，后用纯水洗至无醇味。 过柱：取约30mL上述样品液缓慢倒入层析柱中，弃除前30mL流出液（水），收集剩下的多糖流出液。全波长扫描：将流出液与样品液在200nm~800nm波长下进行全波长扫描，比较脱色前后紫外吸收图谱的变化，确定最大吸收波长[23]。 标准葡萄糖标准曲线的制备[24] 干燥葡萄糖：取标准葡萄糖，于真空干燥器中干燥约4h后，储存与棕色试剂瓶中，置于干燥皿中备用。 标准曲线的制备：准确称取干燥后的分析纯葡萄糖48mg，置于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容，配置成0.48mg/mL的标准葡萄糖溶液。从此标准葡萄糖溶液分别吸取1.0mL于2mL、5mL、10mL、20mL、25mL、50mL和100mL容量瓶中，用蒸馏水定容。分别从定容后的葡萄糖溶液和原标准葡萄糖溶液中吸取1.0mL溶液于具塞试管中，依次加入0.5mL5%苯酚溶液，摇匀，再加入2.0mL浓硫酸，迅速摇匀，置于恒温90℃水浴中加热10min，冷却至室温，于490nm测定吸光度。以蒸馏水同法操作加等量5%苯酚和浓硫酸做空白。以葡萄糖溶液的糖含量（mg/mL）为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。 （3）牛血清蛋白标准曲线的制备[27] 准确称取牛血清蛋白（BSA）20.3mg，置于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容，配置成0.203mg/mL的BSA溶液。从此标准BSA溶液分别吸取1.0mL于2mL、5mL、10mL、20mL、25mL、50mL和100mL容量瓶中，用蒸馏水定容。分别从定容后的BSA溶液和原标准BSA溶液中吸取1.0mL溶液于具塞试管中，依次加入5.0mL考马斯亮蓝储备液，摇匀，常温下放置5min后，于590nm测定吸光度。以蒸馏水同法操作加等量考马斯亮蓝液做空白。后以BSA溶液浓度（mg/mL）为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。 （4）糖醛酸标准曲线的制备（采用间羟联苯法） 溶液配制：精密称取半乳糖醛酸对照品，加蒸馏水制成浓度为1.0 mg/ mL的溶液，即得对照品储备溶液。量取1、2、4、6、 10 mL对照品储备溶液定容至100mL，配制对照品系列浓度溶液。 称取巴戟多糖适量至250mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，即得供试品溶液。 以新鲜配制的0.5％氢氧化钠溶液，配制0.15％间羟联苯溶液。 用浓硫酸配制0.0125 mol/L四硼酸钠-硫酸溶液。 检测波长：取对照品溶液与供试品溶液各1 mL，置于冰水浴中，分别加入四硼酸钠-硫酸溶液5 mL，摇匀，取出，沸水浴 5 min，冰水浴冷却，加入间羟联苯溶液100 μL，摇匀，室温静置30 min。以蒸馏水同法制备空白对照溶液。 用紫外可见分光光度计在200～600 nm处扫描，观察最大吸收峰。结果在520 nm处有最大吸收。 标准曲线：取系列对照品溶液，按（2）项下操作显色，并以蒸馏水作空白对照，在520 nm下测定吸收度值。以浓度（mg/mL） 为横坐标，以吸收度值为纵坐标，制作标准曲线。 不同树脂种类对脱色效果的影响 实验仪器与材料 主要试剂 巴戟天多糖提取物，95%乙醇，葡萄糖标准品（AR），苯酚（AR），浓硫酸（AR，） 主要仪器 调速多用振荡器，双光束紫外可见分光光度计，水浴锅 树脂 DM130，D101， D152，D941 ，AB-8 表2-1 4种树脂的物