毛细管电色谱技术.pptVIP

毛细管电色谱技术 定义：以电渗流为驱动力，同时在毛细管内填充或在内壁涂覆、键合或交联色谱固定相的一种微柱液相色谱技术。 电色谱的固定相 开管柱电色谱 填充柱电色谱 整体柱电色谱 开管柱电色谱 蚀刻法 溶胶-凝胶法 原位聚合多孔聚合物法 填充柱电色谱  定义: 固定相填充在毛细管内 优点： 整体柱电色谱 有机聚合物整体柱 常用交联剂 基于聚丙烯酰胺的整体柱 基于聚苯乙烯的整体柱 基于聚丙烯酸酯的整体柱 硅胶整体柱 硅胶整体柱的特点 良好的机械强度，耐有机溶剂 硅胶骨架和通孔尺寸可独立控制 颗粒固定化型整体柱 杂化材料整体柱 电色谱的应用 微流控芯片电色谱 手性分离 药物分析 蛋白质、肽分离 核苷、核苷酸和碱基 糖 实例1 手性电色谱整体柱分离手性药物 thalidomide Worldwide sales of chiral drugs Chem. Eng. News, 2001, Vol. 79, No. 40, pp79 350 452 614 812 1330 706 934 1180 0 300 600 900 1200 1500 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 100 million $ N. M. Maier, P. Franco, W. Lindner, J. Chromatogr. A 906(2001)3-33 Chromatography HPLC CEC 实例2 亲水作用色谱分离肽 Typical stationary phases used in HI-CEC 五种肽在CZE 和HI-CEC模式下的分离 HI-CEC分离肽异构体 实例3 亲水作用色谱分离糖 展 望 在线（柱）富集与分离 微流控芯片电色谱 Short and long injection in CE 自富集效应( Self –concentraion effect ) * * 概 述 20世纪50年代，Muold 将电场引入薄层色谱，分离了胶棉中多糖成分。 1974年，Pretorius将电场引入毛细管填充柱色谱，分离了数种溶质。 1981年，Jorgenson 将10?mODS填料填入170 ?m i.d.的Pyrex玻璃柱， 成 功分离了数种多环芳烃，第一次向世人显示了CEC 的巨大潜力。 Jorgenson, J.W., Lukacs, K.D., J.Chromatogr.1981,218.209~216 电驱动和压力驱动下的流型比较 毛细管电色谱特点 分离效率比HPLC 高 选择性比CE 高 分析速度快，分析结果重现性好 可实现样品的富集和预浓缩 基 本 理 论 High EfficiencyHigh Selectivity Knox 研究表明：只要填料颗粒粒径?0.5?m,电渗流速度就与填料的大小 无关，与填充均匀程度也没有关系，所以分离效率高，重现性好。 HPLC： 5~10?m CEC: 1.5~3.0?m 分子扩散项 实验条件选择 ? 操作电压 适当提高有利于快速分离 缓冲液pH和浓度 ≤10mmol/L ? 有机溶剂种类和浓度 ? 柱子的长度 定义： 在毛细管内壁键合、涂覆固定相 优缺点：制备简单，柱效高 相比低，柱容量小 J.J. Pesek, et al. J Chromatogr A,2000,887,31 C. Horvath, et al. J. Chromatogr. A,1999, 858, 91 制 柱 步 骤 ?制备步骤繁琐 ?重现性较差 缺点： 优势：高的柱效；丰富的固定相资源 定义：在毛细管内原位聚合反应或固化 ，形成均一整体的 固定相。 整体柱 有机聚合物整体柱 硅胶整体柱 颗粒固定化整体柱 杂化材料整体柱 常用单体 O N H 2 O O O C l O O Research groups: Hjerten S. Freitag R. Novotny M.V. Fujimoto C, Fujise Y. Anal.Chem.,