第13章色谱法导论.pptVIP

色谱法的定义： 13.1.2 色谱法的分类 按两相物态分类 13.1.3 色谱法的特点 说明： tR 和 t? R与流动相的流速有关，流速越大，tR和 t? R越小。 VR 和 V? R与流动相的流速无关。 13.2.2 分配系数和分配比（描述分配过程的参数） 1. 分配系数（平衡常数）K （Partition Coefficient） 在一定温度和压力下，达到分配平衡时： 讨论——色谱分离中的四种情况 2. 分配比Kˊ(容量因子或容量比) (Partition ratio) 3. K与Kˊ的关系 VM近似等于死体积。 VR=VM（1+ Kˊ） （13－11 a) tR= tM（1+ Kˊ） 或 t/R= tMKˊ （13－11b） n和H—是描述色谱柱柱效能的指标 （13－13） 据塔板理论可导出 ： 注：在实际应用中，有时n很大，柱效却不高。 原因：tM包括在tR内，它不参加柱内分配，使n或H 与实际柱效不一致。 2. 塔板计算公式 当L一定时， n↗ 或H↘，则分配平衡的次数↗ 柱效↗ 当tR一定时，峰越窄 ，则柱效越高。 （1）理论塔板数n 和理论塔板高度H 的计算 （13－14） （2）有效塔板数neff和有效塔板高度Heff的计算 neff 越大或Heff越小，则色谱柱的柱效越高。 说明:（1）同一色谱柱对不同物质的柱效不同。 （2）讨论柱效时应指明色谱条件和用什么物质测量的。 计算塔板数时，保留值与W或W1/2的单位必须要统一。 扣除了死时 间的影响 例3:在一根 3 m长的色谱柱上分析某试样时，得如下色谱图及数据： 试计算： (1) 调整保留时间 (2) 该色谱柱的有效塔板数 neff (3) 两组分的相对保留值 1min 14min 17min W=1min 3．塔板理论的作用和局限性 作用：(1) 用热力学观点阐明了溶质在色谱柱中的分配平衡 和分离过程； (2) 成功地解释了流出曲线的形状（趋近于正态分布） 及浓度极大植的位置（t=tR）; (3) 提出了用neff 或 Heff来定量地评价柱效。 局限性：基本假设未能全面反映色谱分离的本质。 色谱过程与热力学和动力学因素皆有关，存在着分子扩散和传质阻力。 （1）不能解释色谱峰变宽的原因或影响板高的因素； （2）不能解释同一组分在不同流速下会得到不同的理论塔板数n。 13.2.4 速率理论（rate theory）—色谱过程动力学理论 1956年—荷兰人Van Deemter 研究填充柱GC时提出的 该理论指出了影响色谱峰展宽的主要因素有： 式中：A、B、C为常数， u 为流动相平均线速度cm/s。 涡流扩散项 分子扩散项 传质阻力项 （1-16） 1. 气相色谱速率理论方程一Van Deemter方程 （13－15） 填充柱气相色谱： A Cu 空心毛细管柱气相色谱（A=0）： （13－16） （1）速率理论讨论 ① 涡流扩散项 (eddy diffusion term) λ一填充不规则因子 dp一填充物颗粒的平均直径 色谱柱内，当载气碰到填充固定相时，会不断改变流动 方向，从而使组分在气相中形成类似涡流的流动，走的路径 有长有短，流出柱子有先有后，使色谱峰展宽。见下图 图13－2涡流扩散对峰展宽的影响 1 2 3 1 2 3 同一组分的 三个分子 λ 和dp越小，则A 越小，柱效越高。 结论:用适当小颗粒的填料,使填充紧密而均匀,是减小涡流扩散,提高柱效的有效途径. 空心毛细管柱，无填料，即A=0 ② 分子扩散项 (Longitudinal diffusion) 组分分子在柱子的填充空隙内，因浓差而引起从高浓度到低浓度的扩散。 样品 B—— 分子扩散系数 γ—— 弯曲因子，空心柱γ =1； 填充柱γ 1 。 Dg一试样组分在气相中的扩散系数 cm﹒s-1 柱温↑→ Dg ↑ 。 M载气↑ P柱↑，T柱↓ 分子扩散↓——柱效↑ u ↑ 因此，GC中，为降低分子扩散，易选用： 重载气（如N2） 较高的载气流速 降低柱温，增大柱压。 ③ 传质阻力项 (mass transfer resistance) cu 组分在两相间进行质量传递时，产生传质阻力，使分配不能“瞬间”达到平衡，从而使色谱峰展宽。