2植物组织与器官培养.pptVIP

植物激素：自然状态下产生的、对生长发育有显著作用的微量有机物。 包括：生长素、细胞分裂素、赤霉素、乙烯等。 生长素：促进细胞分裂、诱导根的分化。常用的有吲哚乙酸（IAA）、2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA) 细胞分裂素：促进细胞分裂、诱导芽的形成。常用的有6-苄氨基嘌呤（BA）、6-呋喃氨基嘌呤（又称激动素，KT） 常用培养基 （1）富盐平衡培养基：MS、LS、BL、BM、ER （2）高硝态氮培养基：B5、N6、SH （3）中盐培养基：Nitsch、Miller、H （4）低盐培养基：White、WS、HE、HB 3.2 植物胚胎培养 植物胚胎培养：指对植物的胚及胚器官（如子房、胚珠）进行人工离体无菌培养，使其发育成幼苗的技术。 1、成熟胚培养：指子叶期至发育成熟的胚的培养。 2、幼胚培养：指早期原胚、球性期胚、心形期胚、鱼雷期胚的培养。 3、胚乳培养：指处于细胞期的胚乳组织的离体培养。 4、胚珠和子房培养：胚珠培养指未受精或受精后的胚珠的离体培养。子房培养指授粉和未授粉的子房的离体培养。 3.3 毛状根培养 毛状根：又名发状根，是植株或组织、器官受到发根农杆菌感染后而形成的类似头发一样的根组织。 发根农杆菌中有个Ri质粒， Ri质粒具有两个功能区，其中T-DNA区上有生长素合成基因，生长素可以诱导根的形成。 三种毛状根培养方法 1、外植体接种法：取植物的叶片、茎段、叶柄等无菌外植体，与发根农杆菌共培养2-3天，将植物的外植体移到含有抗生素的选择培养基上进行培养，经过多次继代培养可产生毛状根。 2、茎杆接种法：将植物种子消毒后，在合适的培养基上萌发，长出无菌苗。取茎尖继续培养，等无菌植株生长到一定时候，将植株的茎尖、叶片切去，剩下茎杆和根部，在茎杆上划出伤口，将带Ri质粒的发根农杆菌接种在伤口处和茎的顶部切口处，经过一段时间培养，在接种部位产生毛状根。 3、原生质体-农杆菌共培养法：将原生质体培养3-5天后，加入发根农杆菌进行共培养，然后借助于转化后的细胞激素自养型特性或T-DNA上的抗菌素标记筛选出转化成功的细胞。分裂形成愈伤组织，在无激素培养基上可产生毛状根。 3.3.2毛状根培养的生物反应器 毛状根外形像毛发，容易交织缠绕，所以反应器的内部需要特殊设计满足毛状根的空间分布的均匀性问题。 超声雾化生物反应器分两类： 1、雾化设备与培养装置一体化设计 2、雾化设备与培养装置分开设计 3.3.3 毛状根培养生产次级代谢产物 青蒿毛状根：青蒿素（治疗疟疾） 长春花毛状根：长春花碱（治疗癌症） 紫草毛状根：紫草宁（治疗肝炎） 人参毛状根：人参皂甙（增强体质） 3.1.4 植物组织培养问题分析 （一）起始材料对器官分化的影响 1．母体植株的遗传基础 2．外植体的类型：外植体对诱导反应及其再生能力的影响体现在外植体的生理状态上。总体来讲，生理状态年轻，来源于生长活跃或生长潜力大的组织和器官的细胞更有利于培养，但具体到不同的植物类型则有较大差异。 外植体选取合理与否，不仅影响培养的难易，而且有时甚至影响分化的程度和器官类型。1974 年Tran Thanh Van 等取烟草正在开花的植株的薄层表皮进行培养，结果不同部位的表皮外植体所形成的芽的类型不同。 （二）激素对器官分化的调控 激素在细胞生长与个体发育中具有重要的调控作用。离体培养下的器官分化，在大多数情况下是通过外源提供适宜的植物激素而实现的。在众多的植物激素中， 生长素与细胞分裂素是两类主要的植物激素， 在离体器官分化调控中占有主导地位。 离体培养中， 外源激素在细胞内的吸收和代谢影响到激素的活性从而影响其培养效果。 （三）光照对器官分化的影响 光照时间、强度以及光质对器官分化均有影响。 由于培养条件下光合作用能力较低，因此光照的作用更大程度上是调节细胞的分化状态，而不是合成光合产物。 光照对器官发生的调节可能与其对培养物内源激素平衡的调节有关。 第3章 植物组织与器官培养 3.1 植物组织培养 植物组织培养是指将植物组织（如花药组织、胚乳、皮层等）给予适当的培养条件下，诱导其长成新的完整植株的一种实验技术。 植物组织培养再生的植物——“试管植物”。 3.1.1 发展历史 1902年德国植物学家哈贝尔兰德(Haberlandt)提出了器官和组织可以不断分割直至单个细胞的观点。并首次分离植物并进行培养，但未获成功。被誉为“植物组织培养之父”。 1943年，美国怀特（White）正式提出植物细胞具有全能性，认为每个植物细胞具有该植物的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。 1934年，荷兰植物学家温特发现了生长素，即吲哚乙酸。 1948年，斯科克解决了如何从离体组织和器官中诱导植物再生的问题，并确定了腺嘌呤/生长素的比例是控制芽和