IRNA的转录后加工.pptVIP

Q?噬菌体复制特点： （1）尽可能利用宿主成分，简化自身基因组。 （2）各种蛋白成分效率高，兼具多种功能： Q?复制酶: 复制专一性极高；蛋白合成阻遏物 外壳蛋白：结构蛋白；复制酶合成的调节蛋白 （3）基因表达采用时序调控方式 2 噬菌体Q?复制酶组成： 噬菌体Q?复制酶专一性极高，只作用于自身RNA，对宿主RNA 及其它RNA无反应。并且强烈抑制核糖体与RNA结合。 亚基 来源 功能 I（?） 宿主核糖体蛋白S1 与噬菌体Q? RNA结合 II（?） 噬菌体编码、合成 聚合反应活性中心 III（?） 宿主细胞EF-Tu因子 与底物结合，识别模板并选择底物 IV（?） 宿主细胞EF-Ts因子 稳定?和?亚基 首先酶吸附在Q? RNA3 ’端，以Q?正链为模板合成负链；再以负链为模板合成大量正链，并合成成熟所需要的蛋白。 需要HFI和HFII 速度35Nt/s 不需HFI和HFII 第二节 RNA的转录后加工 RNA成熟 转录后加工（post-transcriptional processing） 一 原核生物中RNA的加工： （一）原核生物 rRNA前体加工： pppA 6500nt （二）原核生物 tRNA前体加工： 1. tRNA前体两侧切断(cutting)及修剪(trimming) ： 1）5’ tRNA成熟酶 ——RNase P RNase P 蛋白：20 kDa RNA（M1RNA）：ribozyme RNase P是识别RNA特定空间结构而非一级结构的核酸内切酶 2）tRNA 3’-端：切割 —— RNase F 成熟 —— RNase D 2. tRNA 3’-末端CCAOH 结构的形成： （1）自身含有-CCAOH结构， 经过修剪后暴露。 （2）由tRNA核苷酰转移酶催 化形成-CCAOH ： tRNA + 2CTP+ATP? tRNA -CCAOH +3PPi 3. tRNA分子中核苷酸修饰 和异构化： 例如：假尿嘧啶（?）的 形成（U糖苷键移位， N1 ? C5） 切除tRNA前体两端多余的序列： 5’—端切除几到10个核苷酸。 b、末端添加：3’-端添加CCA序列。 c、修饰：形成稀有碱基如DH2 。 RNAaseP RNAaseP RNAaseF RNAaseF RNAaseD RNAaseD ACC ? ? 核酸内切酶的作用 核苷酰转移酶的作用 核酸外切酶的作用 异构化酶的作用 （三）原核生物 mRNA前体加工： 细菌的mRNA大多数不需要加工，边转录边翻译。 少数如核糖体蛋白L10和L7/L12和RNA聚合酶的?和?’亚基 组成多顺反子转录产物，需要经RNase III切割后分别翻译 细菌mRNA的特点： ①多顺反子：一个mRNA可以翻译出不止一个蛋白产物 ②半衰期短： mRNA降解在转录开始后1min就开始了 mRNA平均半衰期为2min（脊椎动物3hr) ③ 5’端无帽子结构， 3’端只有较短的polyA结构 ④ 起始密码上游7~12bp处有一个SD序列（Shine-Dalgarno sequence)，与核糖体小亚基16S rRNA 3’端互补 二 真核生物 RNA的一般加工： （一）真核生物 rRNA前体加工： 真核生物 rRNA前体合成、加工及核糖体装配都在核仁中进行。受核仁小分子RNA（snoRNA）指导 真核生物 rRNA基因无内含子，有也不被转录。 5S rRNA基因簇 RNA聚合酶III转录 加工? 5S 真核生物 rRNA基因成簇排列： 32S (2.1 ?106）? 28S (1.7 ?106） 45S ?41S ? 5.8S (5 ?10 4） 20S (0.9?106）? 18S（0.65 ?106 ） 由RNA聚合酶I转